產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 產(chǎn)品名稱:禽流感病毒基因分型PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 規(guī)格:50T 編號(hào):HE31978-R 類別:PCR檢測(cè)試劑盒 儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。 ? 儲(chǔ)需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開(kāi)即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 正己烷中3,3',4,4'-四氯聯(lián)溶液(PCB77) 1.2ml Actinomyces spp.放線菌屬通用染料法熒光定量PCR試劑盒 正己烷中溴菊酯溶液 1.2ml Actinomyces spp.放線菌屬通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 甲醇中阿特拉津溶液 1.2ml Adeno-associad Virus(AAV)腺伴隨病毒PCR試劑盒 甲醇中五氯溶液 1.2ml Adeno-associad Virus(AAV)腺伴隨病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 甲醇中環(huán)氧七氯B溶液 1.2ml Adeno-associad Virus(AAV)腺伴隨病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 正己烷中環(huán)氧七氯B溶液 1.2ml Adenovirus(AV)腺病毒A型PCR試劑盒 正己烷中環(huán)氧七氯A溶液 1.2ml Adenovirus(AV)腺病毒A型染料法熒光定量PCR試劑盒 甲醇中氟溶液 1.2ml Adenovirus(AV)腺病毒A型探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 甲醇中對(duì)溴氟溶液 1.2ml Adenovirus(AV)腺病毒B型PCR試劑盒 甲醇中正丙溶液 1.2ml Adenovirus(AV)腺病毒B型染料法熒光定量PCR試劑盒 甲醇中對(duì)硝基氯溶液 1.2ml Adenovirus(AV)腺病毒B型探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 甲醇中2,6-二硝基甲溶液 1.2ml Adenovirus(AV)腺病毒C型PCR試劑盒 甲醇中1,4-二硝基溶液 1.2ml Adenovirus(AV)腺病毒C型染料法熒光定量PCR試劑盒 甲醇中1,3-二硝基溶液 1.2ml Adenovirus(AV)腺病毒C型探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 甲醇中1,2-二硝基溶液 1.2ml Adenovirus(AV)腺病毒D型PCR試劑盒 組蛋白/HistoneBR250毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,9064-47-52~8℃ 1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, 中文名稱: 組蛋白 英文名稱: Histone 產(chǎn)品規(guī)格: BR 包裝: 250毫克/1克 CAS號(hào):9064-47-5 分子量:約10000~20000 級(jí)別:BR 產(chǎn)品描述:Lyophilized a dialyzed,lyophilized powder.Unfractionad mixture of histones 性狀:干粉,未經(jīng)分割的組蛋白混合物,指所有真核生物的核中,與DNA結(jié)合存在的堿性蛋白質(zhì)的總稱。通常含有H1,H2A,H2B,H3,H4等5種成分。除H1外,其他4種組蛋白均分別以二聚體(共八聚體)相結(jié)合,形成核小體核心。DNA便纏繞在核小體的核心上。而H1則與核小體間的DNA結(jié)合。 用途:生化研究。一般認(rèn)為組蛋白作為結(jié)構(gòu)支持體的作用比其基因調(diào)節(jié)作用更為重要。組蛋白可受到甲基化、乙?;⒘姿峄?、聚ADP核糖?;?,以及與泛醌(ubiquinone)相結(jié)合等幾種類型的修飾。 保存:2~8°C 核酸組蛋白(小牛胸腺)/Histones nucleo from calf thymusBR250毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,2~8℃ 1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, 中文名稱: 核酸組蛋白(小牛胸腺) 其他中文名稱: 核蛋白(小牛胸腺) 英文名稱: Histones nucleo from calf thymus 產(chǎn)品規(guī)格: BR 包裝: 250毫克/1克 級(jí)別:BR 產(chǎn)品描述:A complex of histone and DNA.A dialyzed,lyophilized powder Ref:Zamenhof,S.Methods in Enzymology,Vol.III,696(1957) 性狀:干粉,由DNA與組蛋白形成的核蛋白。核蛋白的一種。是DNA和堿性蛋白組蛋白由離子鍵結(jié)合所形成。存在于細(xì)胞核內(nèi),是構(gòu)成染色質(zhì)的主要成分。核酸和組蛋白的重量比約為1∶1。在1摩耳以上的食鹽水中可解離為兩種成分,并溶解,在食鹽水濃度降低到0.14摩耳時(shí),復(fù)結(jié)合成白色絮狀沉淀。在更低濃度的食鹽水中有不解離而溶解的傾向 用途:生化研究。核蛋白在遺傳及蛋白質(zhì)合成中起著決定性作用。 保存:2~8°C 粘蛋白/MucinBR,牛頜下腺100毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,84195-52-82~8℃ 500毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, 中文名稱: 粘蛋白 英文名稱: Mucin from bovine submaxillary glands 禽流感病毒基因分型PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格G蛋白偶聯(lián)受體58抗體Senkyunolide C別名: 分子式: C12H12O3性狀: Powder純度: 96.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù) G蛋白偶聯(lián)受體128抗體Docosanoic acid別名: 分子式: C22H44O2性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù) G蛋白偶聯(lián)受體128抗體Glycerol別名: 分子式: C3H8O3性狀: Oil純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù) G蛋白偶聯(lián)受體146抗體Pilosol A別名: 分子式: C13H12O性狀: Oil純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù) G蛋白偶聯(lián)受體146抗體Methyl 4-O-feruloylquina別名: 分子式: C18H22O9性狀: Powder純度: 95.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù) G蛋白偶聯(lián)受體17抗體Trehalose別名: 分子式: C12H22O11性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 對(duì)照品;標(biāo)準(zhǔn)品;微生物代謝產(chǎn)物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù) G蛋白偶聯(lián)受體19抗體1,4:3,6-Dianhydro-α-D-glucopyranose別名: 分子式: C6H8O4性狀: Powder純度: 97.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù) G蛋白偶聯(lián)受體20抗體Senkyunolide A別名: Sedanenolide分子式: C12H16O2性狀: Oil純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù) 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 |