實(shí)驗(yàn)外包: 1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析 2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq 3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM 4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR 5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA 6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選 7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR 8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建 服務(wù)流程: 接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。 ? 產(chǎn)品名稱 | 極小棒桿菌PCR檢測試劑盒 | 英文名稱 | Corynebacterium minutissimumPCR | 貨號 | HE30851-R |
使用方法: 一、樣品 DNA 的制備 用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。 二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。 1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。 2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。 3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。 4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。 5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。 6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。 8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟: 方法 1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。 3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 特點(diǎn)優(yōu)勢: 1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。 2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。 3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。 4. 實(shí)用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。 5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。 6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。 L-甘-異白二肽/甘氨酰-L-異亮氨酸/Gly-lleu 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,進(jìn)分 包裝;5g L-甘-纈二肽/甘氨酰-L-纈氨酸/Glycyl-L-Valine/Gly-Vlu 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g L-甘-甘-白三肽/甘氨酰-甘氨酰-L-亮氨酸/Gly-Gly-Len 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g L-甘-甘-甘三肽/甘氨酰-甘氨酰-L-甘氨酸/二甘氨酰甘氨酸/三甘氨肽/三甘氨酸/Gly-Gly-Gly 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1g L-甘-甘-異白三肽/甘氨酰-甘氨酰-L-異亮氨酸/Glycylglycyl-L-isoleucine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g L-甘-甘-纈三肽/甘氨酰-甘氨酰-L-纈氨酸/Gly-Gly-Val 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g ?;撬?2-氨基乙磺酸/牛膽堿/氨基乙磺酸/牛膽素/Taurine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR 包裝;1g D(-)樟腦磺酸/D-樟腦-10-磺酸/(+)-樟腦-10-磺酸/樟腦磺酸/(1S)-7,7-二甲基-2-氧代-二環(huán)[2.2.1]庚烷-1-甲磺酸/Camsylate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g L-(-)樟腦磺酸/樟腦磺酸/7,7-*基二環(huán)[2.2.1]庚烷-2-酮-1-甲磺酸/1R-(-)-樟腦磺酸/1-樟腦磺酸/L-樟腦-10-磺酸/左旋樟腦磺酸/L(-)-Camphorsulfonic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR 包裝;1g 樟腦/2-莰酮/樟腦醑/1,7,7-*基二環(huán)[2.2.1]庚烷-2-酮/柏木精腦/(±)-樟腦(合成)/坎酮/莰酮-[2]/Camphore 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR 包裝;25g 肌氨酸/N-甲基甘氨酸/甲氨基乙酸/肉素/肉氨基酸/肉桂基酸/N-甲基氨基乙酸/Sarcosine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR 包裝;5g 甘氨酸/氨基乙酸/氨基醋酸/Glycine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;100mg BOC-甘氨酸/N-叔丁氧羰基-甘氨酸/BOC-Glycine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;100g 馬尿酸/N-苯甲酰甘氨酸/苯甲酰氨基乙酸/苯甲酰甘氨酸/N-苯甲?;拾彼?馬脲酸/Hippuric Acid 質(zhì)量規(guī)格:>98% 包裝;25g 馬尿酸-L-苯丙氨酸/Hippuryl-L-phenylalanine 質(zhì)量規(guī)格:BR 包裝;500g 雙甘氨肽/N-甘氨酰甘氨酸/甘氨酰甘氨酸/雙甘氨二肽/一縮二氨基乙酸/甘勝/甘氨酰替基氨酸/雙甘肽/Glycylglycine 質(zhì)量規(guī)格:>97% 包裝;100ml 甘氨酸甲酯鹽酸鹽/甘氨酸甲脂鹽酸鹽/鹽酸氨基乙酸甲酯/鹽酸甘氨酸甲酯/氨基乙酸甲酯鹽酸鹽/Glycine methyl ester HCL 質(zhì)量規(guī)格:BR 包裝;25ml 極小棒桿菌PCR檢測試劑盒Alcaligenes│sp. 中文名稱:產(chǎn)堿桿菌種屬:Alcaligenes│sp.分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:檢測、培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:30-37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:99% Aeromonas│veronii 中文名稱:維隆氣單胞菌種屬:Aeromonas│veronii分離基物:草魚腸胃道提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:飼料用木聚糖酶、葡聚糖酶、蛋白酶、植酸酶等的篩選;草魚胃腸道微生物多樣性生態(tài)研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:99% Shewanella│putrefaciens 中文名稱:希瓦菌種屬:Shewanella│putrefaciens分離基物:草魚腸胃道提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:飼料用木聚糖酶、葡聚糖酶、蛋白酶、植酸酶等的篩選培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:98% Sinorhizobium│sp. 中文名稱:中華根瘤菌種屬:Sinorhizobium│sp.分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:在無機(jī)鹽培養(yǎng)基:中以為碳源培養(yǎng),6天內(nèi)可在固體培養(yǎng)基:上形成透明的解圈。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:63生長條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:98% Halomonas│sp. 中文名稱:鹽單胞菌種屬:Halomonas│sp.分離基物:城市污提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:在10%NaCl培養(yǎng)基:上能夠生長。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:98% Agrobacterium│vitis 中文名稱:葡萄土壤桿菌種屬:Agrobacterium│vitis提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:63生長條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:≥98% Achromobacter│sp. 中文名稱:無色桿菌種屬:Achromobacter│sp.分離基物:草魚腸胃道提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:飼料用植酸酶等的篩選培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:37℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:97% Erwinia│cypripedii 中文名稱:杓蘭歐文氏菌種屬:Erwinia│cypripedii分離基物:礦石提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:以磷酸三鈣、磷礦石作為磷源生長培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:97% |