產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 產(chǎn)品名稱(chēng):類(lèi)鼻疽伯克霍爾德菌(BP)核酸試劑盒說(shuō)明書(shū) 規(guī)格:48T/盒 編號(hào):HE32253-R 類(lèi)別:PCR檢測(cè)試劑盒 儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。 ? 儲(chǔ)需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開(kāi)即用,用戶(hù)只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 六氯丁二烯溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1ml Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽傳染性支氣管炎病毒Conn型RT-PCR試劑盒 鎳標(biāo)準(zhǔn)溶液 50mL/瓶 Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽傳染性支氣管炎病毒Conn型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 (R,S)-降煙堿 50mg Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽傳染性支氣管炎病毒Conn型探針?lè)晒舛縍T-PCR試劑盒 β-二烯煙堿 10mg Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽傳染性支氣管炎病毒Delaware型RT-PCR試劑盒 (S)-假木賊堿 20mg Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽傳染性支氣管炎病毒Delaware型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 四螨嗪溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL/支 Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽傳染性支氣管炎病毒Delaware型探針?lè)晒舛縍T-PCR試劑盒 阿特拉津溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL/支 Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽傳染性支氣管炎病毒JMK型RT-PCR試劑盒 準(zhǔn)物質(zhì) 1mL/支 Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽傳染性支氣管炎病毒JMK型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 芐嘧磺隆溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL/支 Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽傳染性支氣管炎病毒JMK型探針?lè)晒舛縍T-PCR試劑盒 殺螟丹溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL/支 Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽傳染性支氣管炎病毒Mass型RT-PCR試劑盒 噻嗪酮溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL/支 Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽傳染性支氣管炎病毒Mass型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 1mL/支 Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽傳染性支氣管炎病毒Mass型探針?lè)晒舛縍T-PCR試劑盒 1mL/支 Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽傳染性支氣管炎病毒荷蘭株RT-PCR試劑盒 滅幼脲溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL/支 Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽傳染性支氣管炎病毒荷蘭株染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 L/支 Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽傳染性支氣管炎病毒荷蘭株探針?lè)晒舛縍T-PCR試劑盒 對(duì)氨基甲酸/4-氨基甲酸/對(duì)酸/PABAAR,99.5%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,150-13-0RT,避光 500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, 中文名稱(chēng): 對(duì)氨基甲酸 其他名稱(chēng): 4-氨基甲酸;對(duì)酸 英文名稱(chēng): PABA 其他名稱(chēng): p-Aminobenzoic acid;4-Aminobenzoic acid;Vitamin Bx;Vitamine H1 產(chǎn)品規(guī)格: AR,99.5% 包裝:100克/500克 產(chǎn)品規(guī)格: 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99% 包裝:100毫克 CAS號(hào):150-13-0 C7H7NO2=137.14 級(jí)別:AR 含量:≥99.5% 硫酸鹽:≤0.01% 氯化物:≤0.01% 熔點(diǎn):186.5~188.5℃ 碳酸鈉溶解試驗(yàn):合格 鐵:≤0.002% 重金屬:≤0.001% 灼燒殘?jiān)?le;0.03% 級(jí)別:分析標(biāo)準(zhǔn)品 含量:≥99.0%(HPLC) 性狀:?jiǎn)涡崩庵w結(jié)晶。露置空氣和光線(xiàn)中變淺黃色。易溶于沸水,能溶于醇、乙酯及冰,微溶于水及。0.5%溶液的pH值為3.5。半數(shù)致死量(小鼠,經(jīng)口)2850mg/kg。有刺激性。溶解度:4.7 g/L水(20°C),121 g/L 乙醇。相對(duì)密度:1.374。它是機(jī)體細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂所必需的物質(zhì)葉酸的組成成分之一,在酵母、肝臟、麩皮,麥芽中含量甚高 用途:生化研究。用作測(cè)定銅的試劑。用于酯類(lèi)、葉酸和偶氮染料的合成 保存:RT,避光 類(lèi)鼻疽伯克霍爾德菌(BP)核酸試劑盒說(shuō)明書(shū)人單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA Kit,48T/96T 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用 小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Penicillium raistrickii 大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA Kit,48T/96T 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用 人巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Rhizopus stolonifer 小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Arthrobacter arilaitensis 大鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Sporosarcina sp. 人巨噬細(xì)胞來(lái)源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Candida kefyr 小鼠巨噬細(xì)胞來(lái)源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Isaria fumosorosea 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 |