產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 產(chǎn)品名稱:瓜納圖巴病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱:Guaratuba VirusRTPCR 編號:HE31039-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 ? 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 鈹試劑II/8-羥基萘-3,6-二磺酸(1-偶氮-2′)-1′,8′-二羥基萘-3′,6′-二磺酸四鈉鹽/H酸偶氮變色酸鈉/2-(8-羥基萘-3,6-二磺酸鈉偶氮)-1,8-二羥基萘-3,6-二磺酸鈉/Beryllon II 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) 包裝;1g 石墨粉/黑鉛/筆鉛/半石墨/不純石墨/墨鉛/炭精/石墨潤滑劑/膠體石墨/導(dǎo)電敷層/Graphite powder 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) 包裝;500mg 人造沸石/交替砂/軟砂/變通質(zhì)/沸石/Permutit 質(zhì)量規(guī)格:>92.0%(T) 包裝;100mg 鈉石灰/蘇打石灰/堿石灰/蘇打石灰混合物/鈉鈣玻璃/Soda lime 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) 包裝;1g 海砂/石英玻璃/Sea sand 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)(T) 包裝;25g 脂質(zhì)體2000/Lipofectamine 2000 Transfection Reagent 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) 包裝;5g 辛可寧/弱金雞鈉堿/4-喹啉基(5-乙烯基-1-氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛烷-2-基)甲醇/金雞寧/辛可尼/Cinchonine 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) 包裝;1g 羅丹寧/銀試劑/羅丹酸/2-硫代-4-噻唑烷酮/繞丹寧/2-硫代-2,4-噻唑烷二酮/2-硫-4-氧四氫噻唑/Rhodanine 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T) 包裝;25g N-甲基吩嗪甲基硫酸鹽/N-甲基二苯并吡嗪甲基硫酸鹽/吩嗪二甲酯硫酸鹽/5-甲基吩嗪硫酸甲酯/吩嗪硫酸甲酯/甲硫吩嗪/硫酸甲酯吩嗪/PMS 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(N)(T) 包裝;5g 草酸二乙酯/乙二酸二乙酯/草酸乙酯/二乙基草酸/Diethyl oxalate 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 包裝;10g /精/粒/Iodine 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)(T),用于高效液相色譜標(biāo)記 包裝;50g 紅色硫化汞/朱砂/銀朱/硫化汞/硫化汞(II)/辰砂/丹砂/Chinese red 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) 包裝;25g 三苯基氧化膦/三苯基氧膦/2-乙醇/三苯基磷氧/氧化三苯磷酸/氧化三苯膦/Triphenylphosphine oxide 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;5g 皂土/膨潤土/漿土/膠狀黏土/斑脫巖/膠膨潤土/膠體粘土/膠質(zhì)粘土/高鈉膨潤土/泥漿膨潤土/班脫巖/Bentonite 質(zhì)量規(guī)格:用于薄層色譜顯色劑 包裝;5g 漂白土粉/漂洗泥/Floridin 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) 包裝;5g 碳化硼/Boron carbide 質(zhì)量規(guī)格:99.8原子%D 包裝;100g 三氧化二硼/氧化硼/硼酐/三氧化硼/硼酸酐/Boron oxide 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) 包裝;25g 瓜納圖巴病毒PCR檢測試劑盒Anoxybacillus│flavithermus 中文名稱:好熱黃無氧芽孢菌種屬:Anoxybacillus│flavithermus分離基物:樣/上層海提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:微生物/高溫菌(55℃)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:55℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Bacillus│halodurans 中文名稱:耐鹽芽胞桿菌種屬:Bacillus│halodurans分離基物:樣/表層溫泉提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:微生物/高溫菌(60℃)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:60℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Exiguobacterium│arabatum 中文名稱:微小桿菌(加詞待譯)種屬:Exiguobacterium│arabatum分離基物:樣/表層海提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:深海細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:>98.0%(GC) Microbacterium│sediminis 中文名稱:沉積物微桿菌種屬:Microbacterium│sediminis分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:;微生物/耐冷、耐熱、耐鹽微生物培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:221生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:>98.0%(GC) Altererythrobacter│epoxidivorans 中文名稱:食環(huán)氧化物交替赤細(xì)菌種屬:Altererythrobacter│epoxidivorans分離基物:土樣/生活區(qū)土樣提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:1.生物降解;2.生物催化;3.生物活性物質(zhì)篩選;4.海洋微生物生態(tài)學(xué)研究。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:472生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:>98.0%(GC) Rhodococcus│qingshengii 中文名稱:樊慶生紅球菌種屬:Rhodococcus│qingshengii分離基物:土樣/生活區(qū)土樣提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:1.生物降解;2.生物催化;3.生物活性物質(zhì)篩選;4.海洋微生物生態(tài)學(xué)研究。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:472生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Nocardioides│furvisabuli 中文名稱:黑沙類諾卡氏菌種屬:Nocardioides│furvisabuli分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:1.生物降解;2.生物催化;3.生物活性物質(zhì)篩選;4.海洋微生物生態(tài)學(xué)研究。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:472生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Arthrobacter│humicola 中文名稱:居土節(jié)桿菌種屬:Arthrobacter│humicola分離基物:沉積物/湖邊沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:1.生物降解;2.生物催化;3.生物活性物質(zhì)篩選;4.海洋微生物生態(tài)學(xué)研究。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:472生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 |