熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡(jiǎn)便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測(cè)的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問(wèn)題可以通過(guò)熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過(guò)PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩?lái)說(shuō)，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來(lái)，從而使其發(fā)出熒光。檢測(cè)到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問(wèn)題，反應(yīng)結(jié)束后無(wú)需通過(guò)熔解曲線檢測(cè)，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測(cè)產(chǎn)物長(zhǎng)度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來(lái)也叫Real-Time PCR，是美國(guó)PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來(lái)的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
2,2′-雙溴雙(98.0%)Phospho-VEGF Receptor 2 (Tyr1212) (11A3) Rabbit mAb十六烷基二甲基叔

氯(無(wú)水級(jí), 99.5%)Phospho-VEGF Receptor 2 (Tyr1175) (19A10) Rabbit mAb亞酸二叔丁酯

氟溴乙基(97%)Phospho-VEGF Receptor 2 (Tyr1175) (19A10) Rabbit mAb氯甲基酯

2-溴-6-氨基吡啶(98%)Phospho-VEGF Receptor 2 (Tyr1175) (19A10) Rabbit mAb六氟酮三水合物

氨基-2-氟吡啶(95%)POLR1A (D6S6S) Rabbit mAb1,環(huán)已二

2-氯-氟吡啶(98%)VEGF Receptor 2 (55B11) Rabbit mAb無(wú)水醋酸鋰

2,2′-聯(lián)吡啶-3,3′-二(98%)VEGF Receptor 2 (55B11) Rabbit mAb2-(2-二乙基)-5-甲基-吡唑-基

4'-(溴基)-2,2':6',2''-三聯(lián)吡啶(97.0 %)eIF5 Antibody氨基-7H-吡咯[2,d]嘧啶

5-溴-2-基吡啶(95%)Phospho-PLCbeta3 (Ser537) Antibody四氫吡喃-4,二羧酸二甲酯

(Boc-氨基)-吡啶(96%)DLL3 (G93) Antibody(甲基哌-1-基)

4,4'-雙(羥甲基)-2,2'-二吡啶(95%)DLL3 (G93) Antibody芐氧基

6-溴-2-羥甲基吡啶(95%)Cystatin C (D6U3E) Rabbit mAb2-溴-5-三氟甲酸

2,4,5,6-四氨基嘧啶硫酸鹽(≥98.0%)Phospho-PLCbeta3 (Ser1105) Antibody2-溴-5-三氟

2,2'-聯(lián)吡啶(AR,99.0%)CD68 (D4B9C) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)2-甲氧基-5-氟尿嘧啶

煙酸甲酯(99%)VEGF Receptor 3 Antibody2-氟-硝基吡啶

4'-(甲氧基基)-2,2':6',2''-三吡啶(98%)Phospho-FoxO1 (Ser319) Antibody5-氯-2-氟吡啶

2-(對(duì)甲基)吡啶(98%)Sequestosome Signaling Antibody Sampler Kit溴-2,6-二甲

烷磺酸吡啶鹽(98.0%)PYY (D1K3Q)Rabbit mAb (Mouse Specific)4,4'-二羥基二烷
貓嗜衣原體探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒D-酸ELISA試劑盒MLK3  絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MLK3抗體100 ul

D二聚體(D2D)ELISA試劑盒Phospho-MLK3 (Thr277/Ser281)  酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MLK3抗體100 ul

DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶1(T)自身抗體ELISA試劑盒MYL1/MYL2  肌球蛋白輕鏈1/2抗體100 ul

DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子4樣蛋白(DDIT4/RTP801)ELISA試劑盒Phospho-MYL(Ser19)  酸化肌球蛋白輕鏈2抗體100 ul

DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3A(DNMT3A)ELISA試劑盒MYL3/Myosin light chain 3  肌球蛋白輕鏈3抗體100 ul

DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1)ELISA試劑盒Myt1  髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1抗體100 ul

DnaJ同源亞科B成員1(DNAJB1/DNAJ1/HDJ1/HSPF1)ELISA試劑盒Phospho-Myt1 (Ser83)  酸化髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1抗體100 ul

Dickkopf 3(DKK3)ELISA試劑盒MIF  巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子抗體100 ul

Dickkopf 1(DKK1)ELISA試劑盒MIP-1 Alpha  巨噬細(xì)胞炎癥因子1α抗體20 ul
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過(guò)程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無(wú)線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。