特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡(jiǎn)便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測(cè)的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問(wèn)題可以通過(guò)熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過(guò)PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩?lái)說(shuō)，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來(lái)，從而使其發(fā)出熒光。檢測(cè)到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問(wèn)題，反應(yīng)結(jié)束后無(wú)需通過(guò)熔解曲線檢測(cè)，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測(cè)產(chǎn)物長(zhǎng)度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過(guò)程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無(wú)線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來(lái)也叫Real-Time PCR，是美國(guó)PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來(lái)的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒(méi)有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
2-己酮(standard for GC,>99.5%(GC))ATGL (30A4) Rabbit mAbalpha,alpha-二乙酸

正庚(standard for GC,≥98%(GC))Mig6 Antibody1,2-二溴四氟

七氟丁酸(98%)Phospho-eIF4G (Ser1108) Antibody2,6-二溴-

2,5-己二酮(standard for GC,≥99%(GC))Phospho-eIF4G (Ser1108) Antibody二酸單甲酯單鹽

2,5-己二酮(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))HSP27 Antibody (Rodent Preferred)(R)-1-BOC-羥甲基哌

己烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99.8% (GC))PPARγ (81B8) Rabbit mAb5-羥基煙酸

六氟異(HFIP)(用于GC衍生化, ≥99.8% (GC))eIF4H Antibody1,2,4,5-環(huán)己烷四甲酸二酐

甲酸(標(biāo)準(zhǔn)品)VEGF-C Antibody乙酰氨基環(huán)己酮

糠(standard for GC, ≥99.5% (GC))PDI Antibody咪唑并[1,2-a]嘧啶

鄰二甲酸二正戊酯(CP,97%)AS160 Antibody-甲酸

3',3'',5',5''-四溴酚酞乙酯(80%,用于顯微鏡)Glu-Glu Tag Antibody氯-2,8-雙(三氟甲基)喹啉

三氯(無(wú)水級(jí),≥99％,含100-200ppm戊穩(wěn)定劑)PRMT1 (A33) Antibody咪唑并[1,2-a]吡啶

異(無(wú)水級(jí), 99.5%)APP/β-Amyloid (NAB228) Mouse mAb氟鄰二甲酸

四(無(wú)水級(jí),≥99.9%, 無(wú)穩(wěn)定劑)APP/β-Amyloid (NAB228) Mouse mAb2,二氟甲酸

四(ACS,>99.5%(GC))APP Antibody溴-1-甲基-1H-吡唑

正庚烷(AR,98%)PRMT1 (F339) Antibody2,4,5-三氟溴芐

正庚烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.8%(GC))Neuronal Marker IF Antibody Sampler Kit II1-叔丁氧羰基-哌啶乙酸

正庚烷(>99%(GC))PathScan® Total Btk Sandwich ELISA Kit溴鄰二
衣原體通用探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒GDP解離抑制因子2(GdI2)ELISA試劑盒MDM2  雙微體2癌基因抗體100 ul

GAD/IA2自身抗體ELISA試劑盒Phospho-MDM2 (Ser166)  酸化雙微體2癌基因抗體100 ul

G1/S特異性細(xì)胞周期蛋白E1(CCNE1)ELISA試劑盒MDR1/p-GP/CD243  多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體100 ul

F-肌動(dòng)蛋白(F-actin)ELISA試劑盒MEF2A  肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2抗體100 ul

FOS 樣抗原2(FOSL2)ELISA試劑盒Phospho-MEF2A (Thr312)  酸化肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2抗體500 ul

FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt-3L)ELISA試劑盒Phospho-MEF2A (Ser408)  酸化肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2抗體300 ul

FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA試劑盒Megsin  絲氨酸蛋白酶抑制劑B7抗體100 ul

Fc受體樣蛋白3(FCRL3)ELISA試劑盒Melamine  三聚抗體20 ul

FAM172A蛋白(FAM172A)ELISA試劑盒Melamine  三聚抗體300 ul