特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
D-葡糖糖-6-酸二鈉二水USP13 (D4P3M) Rabbit mAb氯-氟

亞硫酸氫鈉(AR)TBP (D5G7Y) Rabbit mAb2-氯-4,5-二氟甲酸

丁二酸鈉(AR)Glucose-6-Phospha Dehydrogenase (G6PD) Activity Assay KitN-乙基乙二

氯化銅二水(AR)ELAVL1/HuR (D9W7E) Rabbit mAb四氫吡喃-羧酸甲酯

牛血紅蛋白Smad2 (D43B4) XP® Rabbit mAb (Biotinylad)乙氧甲?；鶃喖谆?/span>

乙酸鈉CXXC1 Antibody氯甲酸酯

聚乙二10000Lamin B1 (D4Q4Z) Rabbit mAb嗎啉酮

DL-蘋果酸Adipogenesis Marker Antibody Sampler KitN,N-二甲基異

高酸鈉(AR)MITF (D5G7V) Rabbit mAbBoc-L-焦谷氨酸甲酯

硫酸亞鐵七水(AR)α-Parvin (D7F9) XP® Rabbit mAb (Sepharose® Bead Conjuga)甲鋰

酸三HSP27 Antibody Sampler Kit4,6-二甲基-2-羥基嘧啶

鈣黃綠素二鈉鹽Phospho-VEGF Receptor 2 Antibody Sampler KitBoc-甲氨基哌啶

植酸鈉Cleaved Caspase-8 (Asp391) (18C8) Rabbit mAb (PE Conjuga)3,4,5-三氟

乙二四乙酸鐵鈉鹽HEXIM1 (D5Y5K) Rabbit mAb2-氨基異煙酸乙酯

菊粉;菊糖16% Formaldehyde2-氨基煙酸乙酯

三氯化鐵,六水(AR)Phospho-Histone H2A.X (Ser139) Blocking Peptide二甲基氨磺酰氯

孔雀綠DMSO (Dimethyl Sulfoxide)6-甲基噠-3[2H]-酮

聚乙二2000DMSO (Dimethyl Sulfoxide)溴-氟甲
海藻百伯史坦菌探針法熒光PCR檢測試劑盒山羊骨性酸酶(BALP)ELISA試劑盒E.coli DH-5 Alpha  DH5α大腸桿菌菌體蛋白抗體20 ul

山羊骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒E.coli O157:H7  大腸桿菌埃希氏菌O157抗體（腸出血性大腸桿菌埃希氏菌O157:H7）100 ul

山羊骨保護(hù)素(OPG)ELISA試劑盒EPEC/E.coli  腸致病性大腸桿菌抗體1 Kit

山羊谷胱甘肽還原酶(GSR)ELISA試劑盒E.coli/EPEC  抗普通大腸埃希菌菌體蛋白抗體100 ul

山羊谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)ELISA試劑盒E.coli O139  抗志賀毒素大腸桿菌O139抗體（仔豬水腫病志賀毒素大腸桿菌O139）100 ul

山羊孤腓肽(OFQ/N)ELISA試劑盒EP3  E受體3抗體100 ul

山羊睪酮(T)ELISA試劑盒Ephrin A1   EphA1抗體100 ul

山羊肝脂酶(HL)ELISA試劑盒EphA4  酪氨酸蛋白激酶A4抗體1 Kit

山羊膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)ELISA試劑盒Ephrin B  Ephrin B抗體100 ul