PCR技術的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結合到模板上，探針的結合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術解決了熒光染料與非特異性擴增結合的問題，反應結束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術的缺點：
成本高；
設計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應的進行，PCR反應產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
乙酰標準溶液(10μg/ml,基體：酮)NGF Antibody2,二甲基-1-戊

Amberli® XAD16非離子型大孔樹脂(20-60 mesh)CENP-A (C5H3) Rabbit mAb (Mouse Specific)大麥芽硫酸鹽

甲草(標準品)CENP-A (C51A7) Rabbit mAb (Mouse Specific)2,4'-二溴乙酮

甲草標準溶液(100μg/ml,u=3%)Tug Antibody2-異基酸

甲草標準溶液(549mg/L,基體：甲)SimpleChIP® Human PTMA Downstream Primers肼基甲酸

殺螟丹(標準品)Phospho-PKD/PKCμ (Ser916) Antibody2-乙基-4,5-二甲基噻唑

殺螟丹標準溶液(100μg/ml,u=3%)Phospho-PKD/PKCμ (Ser916) Antibody1,8-二乙酰氧基辛烷

殺螟丹標準溶液(10μg/ml,u=3%)Phospho-PKD/PKCμ (Ser916) AntibodyE-PENN-1-YLBORONIC ACID

莎稗(標準品)Phospho-PKD/PKCμ (Ser744/748) AntibodyN-FMOC-1-氨基環(huán)烷羧酸

乙草(標準品)Phospho-PKD/PKCμ (Ser744/748) Antibody5-AMINO-CYA-(2-CHLOROPHENYL)-METHYLPYRAZOLE

乙草標準溶液(100μg/ml,u=2%)Phospho-PKD/PKCμ (Ser744/748) Antibody氨基-2,6-二甲基嘧啶

乙草標準溶液(10μg/ml,u=3%)Phospho-PKCdelta (Tyr311) Antibody1-甲基環(huán)烷-1-羧酸

三唑錫(標準品)PKCα Antibody二酚硫酸二鹽二水合物

Amberli® IRA410 離子交換樹脂(719(202)是高等級凝膠強Ⅱ型陰離子交換樹脂)PKCα Antibody辛乙二單正十二烷基酯

酸二氫銨（分析標準品,用于凱氏定氮法氮測定,≥99.5%）TIGIT (E6L7H) Rabbit mAb1,二異基

酸二氫銨(for HPLC,≥99.0%(T))PKCδ Antibody反式-2-癸酸乙酯

Amberli XAD7HP 離子交換樹脂(Mesh 20-60)Phospho-LIN28A (Ser200) (D5I6X) Rabbit mAb1-(BROMOPHENYLSULFONYL)-2-METHYL-1H-IMIDAZOLE

Amberli XAD-4 非離子型大孔樹脂(粒徑0.49 - 0.69 mm)Phospho-PKC (pan) (zeta Thr410) (190D10) Rabbit mAb2-基
犬細小病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒白喉抗體(Diphtheria Ab)ELISA試劑盒Kif14 proin   驅動蛋白家族Member14蛋白抗體100 ul

八聚體轉錄因子(OTF2B)ELISA試劑盒KIF17  驅動蛋白家族KIF17抗體100 ul

八聚體轉錄因子(OTF2A)ELISA試劑盒Kiss-1  腫瘤轉移抑制基因抗體100 ul

艾柯病毒IgM(ECHO IgM)ELISA試劑盒Klf4  腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子/上皮鋅指蛋白4抗體100 ul

艾柯病毒IgG(ECHO IgG)ELISA試劑盒KLF5  腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5抗體100 ul

艾杜糖硫酸酯酶(IDS)ELISA試劑盒phospho-Kinesin 5B (Ser272)  酸化Kinesin 5B抗體100 ul

癌癥促凝素(CP)ELISA試劑盒phospho-Kinesin 5B (Ser275)  Kinesin 5B抗體20 ul

癌抗原27-29(CA 27-29)ELISA試劑盒KLF2  肺Kruppel樣因子抗體100 ul

癌基因蛋白質p190/bcr-abl ELISA試劑盒KLF6  轉染抑癌基因KLF6抗體100 ul