產(chǎn)品僅用于科研注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 產(chǎn)品名稱:巴爾通體通用PCR檢測試劑盒 英文名稱:Bartonella spp.PCR 編號:HE30687-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 ? 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 60S核糖體蛋白L17試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;25g 5-羥色胺受體6試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,植物激素級 包裝;1g 5羥色胺/血清素/血清胺試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g 5羥色胺/血清素/血清胺試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1g 5羥色胺/血清素/血清胺試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;250mg 5羥色胺試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g 5羥基吲哚乙酸試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1g 5羥二十碳四烯酸試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>50%,Ind Grade 包裝;250mg 5核苷酸酶試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>50%,BS 包裝;25g 5'-AMP活化蛋白激酶α-2催化亞基試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>50%,BS 包裝;5g Ⅳ型前膠原氨基末端肽試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;100g Ⅳ型膠原試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;25g 4-羥基壬烯酸試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1g 40S核糖體蛋白S19試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g Ⅲ型前膠原肽試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:Ind Grade 包裝;10MG Ⅲ型前膠原氨基末端肽試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;25g Ⅲ型前膠原氨基端肽試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,BR 包裝;5g 巴爾通體通用PCR檢測試劑盒Aspergillus│niger 中文名稱:黑曲霉種屬:Aspergillus│niger提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:中國藥典質(zhì)控菌株。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014生長條件:25-28℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:99% Aspergillus oryzae 中文名稱:米曲霉種屬:Aspergillus oryzae提供形式:斜面培養(yǎng)物/凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究;。醬油試驗。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:5 °Bé麥芽汁瓊脂:5°Bé麥芽汁 1.0L,瓊脂 15.0g,自然pH。生長條件:28℃,好氧。生長特性菌落質(zhì)地疏松,起初白色或黃色,即變?yōu)辄S褐色至淡綠褐色。反面無色。分生孢子穗放射形;分生孢子梗壁很薄,粗糙;頂囊近球形或燒瓶形;分生孢子幼時洋梨形或橢圓形,老后大多變?yōu)榍蛐位蚪蛐危植诨蚪诠饣?。能產(chǎn)生大量的曲酸,蛋白質(zhì)分解力強(qiáng)。存儲條件:2-8℃。真空冷凍干燥法 純度:98% Aspergillus tubingensis 中文名稱:塔賓曲霉種屬:Aspergillus tubingensis提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)半纖維素酶。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:查氏瓊脂(Czapek's Agar):蔗糖 30.0g,NaNO3 3.0g,MgSO4·7H2O 0.5g,KCl 0.5g,F(xiàn)eSO4·4H2O 0.01g,K2HPO4 1.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH6.0~6.5。生長條件:25~28℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:AR,99.5% Aspergillus│usamii 中文名稱:宇佐美曲霉種屬:Aspergillus│usamii提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:以橡子為原料酒精。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0015生長條件:28-30℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:AR,99.5% Botrytissp. 中文名稱:葡萄孢種屬:Botrytissp.安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:病原菌。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:15生長條件:25-28℃ 純度:Pd ≥26.3% Metarhiziumanisopliaevar.anisopliae 中文名稱:金龜子綠僵菌小孢變種種屬:Metarhiziumanisopliaevar.anisopliae安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:生物防治培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25-28℃ 純度:99.99% trace metals basis Beauveria│bassiana 中文名稱:球孢白僵菌種屬:Beauveria│bassiana提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:昆蟲防治。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014生長條件:25-28℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:94% Metarhizium pingshaense Chenet Guo(1986) 中文名稱:平沙綠僵菌種屬:Metarhizium pingshaense Chenet Guo(1986)提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:防治鞘翅目、同翅目的幼蟲及成蟲。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷酸二氫鉀 3g,硫酸鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。生長條件:24-28℃,好氧。 純度:94% 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 |