服務(wù)流程: 接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。 產(chǎn)品名稱 | 陰溝腸桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書 | 英文名稱 | Enterobacter cloacaePCR | 貨號(hào) | HE30933-R |
實(shí)驗(yàn)外包: 1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析 2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq 3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM 4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR 5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA 6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選 7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR 8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建 ? 特點(diǎn)優(yōu)勢(shì): 1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。 2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。 3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。 4. 實(shí)用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。 5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。 6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。 PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟: 方法 1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。 2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。 3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 使用方法: 一、樣品 DNA 的制備 用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。 二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。 1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。 2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。 3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。 4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。 5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。 6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。 8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 蒽酮/9,10-二氫-9-氧蒽/9(10H)-蒽酮/恩酮/9,10-二氫蒽-9-酮/Anthrone 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;1g 四丁基硫酸氫銨/硫酸氫四丁銨/四丁基硫氫酸銨/正四丁基硫酸氫基銨/四丁基氫銨/硫酸氫化四丁基/TBAHS/IPC-TBA-HS 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;250mg 4,4-雙(二甲氨基)硫代二苯甲酮/4,4-雙(二甲氨基)硫代二甲酮/硫代米氏酮/4,4′-四甲基二氨基硫代二苯甲酮/對(duì),對(duì)′-四甲基二氨基二苯硫酮/4,4′-雙(二甲氨基)硫代二苯甲酮/4,4'-雙二甲氨基硫代二苯甲酮/硫代米蚩酮/雙[4-(二甲氨基)苯基]甲硫酮/4,4'-雙(二基)硫代苯甲酮/Thiomichler's ketone 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;1g 米氏酮/4,4′-四甲基二氨基二苯甲酮/米蚩酮/米氣勒氏酮/四甲對(duì),對(duì)′-二氨二苯甲酮/4,4′-雙(二甲氨基)二苯酮/四甲基米氏酮/4,4'-二(N,N-二甲氨基)二苯甲酮/4,4’-二(N,N-二甲氨基)二苯酮/4,4’-雙(二甲氨基)二苯甲酮/雙二甲氨基苯甲酮/4,4′-雙(二甲氨基)苯甲酮/Michler's ketone 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;250mg 苯芴酮/鍺試劑/苯基芴酮/苯基熒光酮/2,6,7-三羥基-9-苯基熒光酮/2,6,7-三羥基-9-苯基-3H-呫噸-3-酮/9-苯基-2,3,7-三羥基-6-氧蒽酮/2,6,7-三羥基-9-苯基-6-熒光酮/9-苯基-2,3,7-三羥基-6-熒光酮/Phenylfluorone 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;5g 1-苯基-3-甲基-4-苯甲?;吝蜻?1-苯基-3-甲基-4-苯甲酰基-5-吡唑啉酮/4-苯甲?;?3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮/萃取劑II/4-苯甲酰-3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮/4-苯甲?;?3-甲基-1-苯基-2-吡唑-5-酮/HPMBP/PMBP 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;1g 1-苯基-3-甲基-5-吡唑酮/依達(dá)拉奉/3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮/3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮/1,3,5-吡唑酮/1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮/苯基甲基氮茂-5-酮/2,4-二氫-5-甲基-2-苯基-3H-吡唑-3-酮/PMP 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;5g 1-苯基-3-吡唑烷酮/菲尼酮/菲尼酮A/3-甲基-1-苯基-吡唑啉-5-酮/1,3,5-吡唑酮/3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮/1-苯基-3-吡唑啉酮/1-苯基-3-氧-1,2-二氮雜茂/1-苯基-3-吡唑酮/1-苯-3-吡唑啉酮/Phenidone 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;1g α-萘酚苯甲醇/α-納富妥苯/4-[(4-羥基-1-萘基)苯基亞甲基]-1(4H)-萘酮/α-對(duì)萘酚苯/對(duì)萘酚苯甲醇/4,4’-(α-羥基亞芐基)二(1-萘酚)/α-萘酚基萘酚醌基苯甲烷/α-萘酚醌苯基甲烷/α-萘酚醌烷/α-萘酚苯/1-萘酚苯/α-Naphtholbenzein 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;5g 偶氮胭脂紅B/偶氮洋紅B/偶氮紅B/Azocarmine B 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;25g 偶氮胭脂紅G/酸性紅101/偶氮洋紅G/玫紅對(duì)氮蒽/偶氮紅G/羅星杜林/玫紅杜林/Azocarmine G 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;5g 硫堇/勞氏青蓮/勞氏紫/氯化-3,7-二氨基吩噻嗪/7-氨基-3-亞氨基-3H-苯并噻嗪氯化氫/3,7-二氨基吩噻嗪-5-翁氯化物/硫槿/氯化勞氏紫/Thionin 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;100g 酒石黃/肼黃/食用檸檬黃/酸性黃23/1-(4-磺酸苯基)-4-(4-磺酸苯基偶氮)-5-吡唑啉酮-3-羧酸三鈉鹽/食用色素黃色5號(hào)/他特秦/ Tartrazine 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;25g 紅/6-羥基-5-[(2-甲氧基-5-甲基-4-磺本基)偶氮]2-萘磺酸二鈉鹽/紅AC/食品紅17/大紅貝司RC/顯色基艷紅RB/咖喱紅/紅 40 [CI 16035]/C.I.冰染重氮組分13/Allura Red AC 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;5g 日落黃/日落黃FCF/1-對(duì)磺酸苯基偶氮-2-羥基萘-6-磺酸二鈉鹽/食用黃色6號(hào)/食品黃3/食用桔黃/Sunset Yellow FCF 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;5g 麗絲胺羅丹明B/酸性羅丹明B/酸性紅52/二甲苯紅B/麗絲胺玫瑰紅B/里斯沙明玫瑰紅B200/李斯曼羅丹明B/李斯曼若丹明B/麗絲胺堿性蕊香紅B200/酸性玫瑰紅B/酸性桃紅B/柴林紅B/磺化羅丹明B/奇通紅S/硫羅丹明B /Lissamine rhodamine B 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;100g 酚番紅花紅/酚藏紅花/酚藏花紅/3,7-二氨基-5-苯基吩嗪翁氯化物/奎諾二甲基酯/Phenosafranine 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;25g 陰溝腸桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書Penicillium│sp. 中文名稱:青霉菌屬菌種種屬:Penicillium│sp.提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:抗丙肝病毒培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié);-80℃冰箱凍結(jié) 純度:98% Nocardiopsis│kunsanensis 中文名稱:群山擬諾卡氏菌種屬:Nocardiopsis│kunsanensis提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0038生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥 純度:98% Streptomyces│collinus 中文名稱:山丘鏈霉菌種屬:Streptomyces│collinus提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0027生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥 純度:98% Streptomonospora│halophila 中文名稱:嗜鹽鏈單孢菌種屬:Streptomonospora│halophila分離基物:鹽堿土提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:ISP4+10%NaCl生長(zhǎng)條件:37C存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥 純度:98% Byssochlamys│sp. 中文名稱:絲衣霉屬種屬:Byssochlamys│sp.提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:抗癌活性培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥 純度:98% Spicaria│sp. 中文名稱:穗霉屬種屬:Spicaria│sp.提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:抗癌活性培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥 純度:97% Streptomyces│coeruleofuscus 中文名稱:天藍(lán)褐鏈霉菌種屬:Streptomyces│coeruleofuscus提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0027生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥 純度:97% Chaetomium│murorum 中文名稱:突孢毛殼種屬:Chaetomium│murorum分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014生長(zhǎng)條件:26C存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥 純度:99% |