實驗外包: 1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析 2.轉(zhuǎn)錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq 3.蛋白質(zhì)組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM 4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR 5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA 6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選 7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR 8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建 服務流程: 接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務。 ? 產(chǎn)品名稱 | 雞異刺線蟲PCR檢測試劑盒說明書 | 英文名稱 | Heterakis gallinarumPCR | 貨號 | HE31081-R |
使用方法: 一、樣品 DNA 的制備 用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。 二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。 1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。 2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。 3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。 4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。 5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。 6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。 8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。 PCR實驗方法步驟: 方法 1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。 3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 特點優(yōu)勢: 1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。 2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。 3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。 4. 實用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。 5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。 6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。 牛奶蛋白胨/蛋白胨C/Peptonized milk 包裝;25g HYLB肉湯/HYLB Broth 包裝;5g 營養(yǎng)瓊脂/普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基/NA 包裝;1g 營養(yǎng)肉湯/普通肉湯培養(yǎng)基/NB 包裝;250mg 胰蛋白胨培養(yǎng)基/Peptone Water Medium 包裝;5g 堿性蛋白胨/3%氯化鈉堿性蛋白胨/Alkaline Peptone Water 包裝;5g 菌種保存培養(yǎng)基/Strain Store Medium 包裝;1g 豆粉瓊脂/血瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基/血液瓊脂基礎(chǔ)/Blood Agar Base 包裝;25g 細菌L型增菌液 包裝;5g 細菌L型分離瓊脂 包裝;1g 溶血瓊脂基礎(chǔ) 包裝;5g 亞硫酸鈉瓊脂/Sulfite Agar 包裝;10g 龍膽紫血液瓊脂基礎(chǔ) 包裝;1g 硫酸十二烷基鈉瓊脂 包裝;500mg 改良羅氏培養(yǎng)基基礎(chǔ)/L-G Medium Base,Modified 包裝;100g 酸性L-G培養(yǎng)基基礎(chǔ)/Acid L-G medium Base 包裝;25g 堿性L-G培養(yǎng)基基礎(chǔ)/Alkaline L-G medium Base 包裝;5g 雞異刺線蟲PCR檢測試劑盒說明書Marinobacter│lipolyticus 中文名稱:解脂海桿菌種屬:Marinobacter│lipolyticus分離基物:沉積物/TVG沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應用領(lǐng)域:海洋細菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97% Idiomarina│piscisalsi 中文名稱:海源菌(加詞待譯)種屬:Idiomarina│piscisalsi分離基物:沉積物/TVG沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應用領(lǐng)域:海洋細菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97% Halomonas│olivaria 中文名稱:鹽單胞菌(加詞待譯)種屬:Halomonas│olivaria分離基物:沉積物/TVG沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應用領(lǐng)域:海洋細菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:≥99% Micrococcus│yunnanensis 中文名稱:云南微球菌種屬:Micrococcus│yunnanensis分離基物:沉積物/TVG沉積物提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領(lǐng)域:海洋放線菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃-30&存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Nesterenkonia│lacusekhoensis 中文名稱:艾霍湖涅斯捷連科氏菌種屬:Nesterenkonia│lacusekhoensis分離基物:沉積物/TVG沉積物提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領(lǐng)域:海洋放線菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃-30&存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Brachybacterium│alimentarium 中文名稱:食物小短桿菌種屬:Brachybacterium│alimentarium分離基物:其他/法國Gruyere and Beaufort奶酪表面提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:221生長條件:28-30℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Nesterenkonia│xinjiangensis 中文名稱:新疆涅斯特連科氏菌種屬:Nesterenkonia│xinjiangensis分離基物:土壤/高鹽土提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28-30存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:95% Nesterenkonia│aethiopica 中文名稱:埃塞俄比亞涅斯特連科氏菌種屬:Nesterenkonia│aethiopica分離基物:生物樣/污染的羽毛(soiled feather sample)提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28-30存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:95% |