產(chǎn)品僅用于科研注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 產(chǎn)品名稱:皺褶青霉PCR檢測試劑盒說明書 英文名稱:Penicillium rugulosumPCR 編號:HE31369-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 ? 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 抗熒光衰減封片劑(含DAPI) 5ml 別名 DAPI染色封片劑英文名稱 Mounting Medium, antifading (with DAPI)儲存條件 -20℃,避光,有效期1年單位 瓶 產(chǎn)品簡介: 抗熒光衰減封片劑是一種用于減緩熒光衰減的封片試劑。以甘油為基礎(chǔ),加入抗熒光衰減劑,有強烈的 抗熒光衰減作用,用于對熒光組織和細胞樣品的封片。封片后,樣品 4℃或者-20℃避光可保存 2-3 周。本試 劑操作簡單,在封片時用移液槍滴一滴抗熒光衰減封片液,蓋上蓋玻片就可以了。 抗熒光衰減封片劑內(nèi)含 DAPI 即 4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole),是一種能夠與 DNA 強力結(jié)合的熒光染料,常用與熒光顯微鏡觀測。因為 DAPI 可以透過完整的細胞膜,它可以用于活細胞 和固定細胞的染色,顯微鏡下可以看到顯藍色熒光的細胞。DAPI 和雙鏈 DNA 結(jié)合后,大激發(fā)波長為 360nm, 大發(fā)射波長為 460nm?!e名 DAPI染色封片劑英文名稱 Mounting Medium, antifading (with DAPI)儲存條件 -20℃,避光,有效期1年單位 瓶 產(chǎn)品簡介: 抗熒光衰減封片劑是一種用于減緩熒光衰減的封片試劑。以甘油為基礎(chǔ),加入抗熒光衰減劑,有強烈的 抗熒光衰減作用,用于對熒光組織和細胞樣品的封片。封片后,樣品 4℃或者-20℃避光可保存 2-3 周。本試 劑操作簡單,在封片時用移液槍滴一滴抗熒光衰減封片液,蓋上蓋玻片就可以了。 抗熒光衰減封片劑內(nèi)含 DAPI 即 4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole),是一種能夠與 DNA 強力結(jié)合的熒光染料,常用與熒光顯微鏡觀測。因為 DAPI 可以透過完整的細胞膜,它可以用于活細胞 和固定細胞的染色,顯微鏡下可以看到顯藍色熒光的細胞。DAPI 和雙鏈 DNA 結(jié)合后,大激發(fā)波長為 360nm, 大發(fā)射波長為 460nm?!?/span> 20×TBS 500ml 英文名稱 TBS,20×儲存條件 RT,有效期1年產(chǎn)品簡介: TBS 緩沖液是生物學中常使用的等滲緩沖鹽溶液,主要用于免疫組化和原位雜交,酶聯(lián)免疫等實驗中,清 洗免疫印跡實驗中非特異性結(jié)合的抗體等。由 Tris-HCl 構(gòu)成穩(wěn)定的 PH 緩沖體系,NaCl 提供等滲條件。本產(chǎn)品 為 20×濃縮液,稀釋后使用。 組分 濃度 Tris 200 mM NaCl 3 M PH 7.5-7.6 使用說明: 1×TBS 緩沖液配制:量取 50ml 20×TBS 緩沖液,加入 950ml 去離子水定容至 1L,充分混勻?!?/span> 中性樹膠 100ml 有效期 2年級別 FMP grade別名 中性樹脂英文名稱 Neutral balsamCAS 96949-21-2儲存條件 RT外觀(性狀) 無色粘稠液體單位 瓶顯微技術(shù)上使用的優(yōu)良封藏劑,與加拿大樹膠性質(zhì)相似,用途相同,效果較好。中性樹膠與加拿大樹膠相同,是一種天然樹脂,經(jīng)提煉與中和后溶解在透明劑中成60%溶液,折光率與玻璃近似,干燥后凝結(jié)成透明無色的固體,沒有收縮變黃、紋裂的弊病,沒有像加拿大樹膠有年久變黃切片氧化退色等缺點。切片標本有蘇木精、曙紅、番紅、固綠、洋紅染色的,保藏數(shù)年顏色無變化。許多整裝標本如吸血蟲、滌蟲等寄生蟲,用中性樹膠封固,均能取得優(yōu)良效果。 目前中性樹膠廣泛使用在生物學,醫(yī)學作為生物切片封藏劑,以及光學琉璃儀器的粘固劑?!?/span> 10×TBST緩沖液 500ml 英文名稱 TBST,10×儲存條件 RT,有效期1年單位 瓶TBST 緩沖液是生物學中常使用的等滲緩沖鹽溶液,主要用于 Western Blot 實驗中洗去膜上非特異性結(jié)合 的抗體等試劑。由 Tris-HCl 構(gòu)成穩(wěn)定的 PH 緩沖體系,NaCl 提供等滲條件,Tween-20 作為去污劑可增加緩沖液 的洗脫能力。 本產(chǎn)品為 10×濃縮液,需要稀釋成1×工作液后使用,用后請及時擰緊瓶蓋,以防揮發(fā)。4℃保存可延長產(chǎn)品保質(zhì)期,長期不 用建議低溫保存。若產(chǎn)品出現(xiàn)結(jié)晶析出,請置于 37℃水浴至*溶解?!?/span> 10×多聚賴氨酸 10ml 英文名稱 Poly-L-lysine Solution,10×儲存條件 -20℃,有效期2年純度 1mg/ml 產(chǎn)品非無菌 原理: 多聚賴氨酸溶液是廣泛應(yīng)用的組織切片與玻片黏合劑,該多聚陽離子分子與組織切片上的陰離子相互作用會產(chǎn)生較強的黏合力。培養(yǎng)瓶表面的性質(zhì)對于細胞培養(yǎng)至關(guān)重要,細胞表面的糖蛋白(陰性)易于吸附在親水性的表面上,因而細胞培養(yǎng)表面如果有相當含量的陽性電荷更能促進細胞吸附,這正是運用多聚賴氨酸優(yōu)化細胞培養(yǎng)表面的重要所在?!?yīng)用: 適用組織學,免疫組織化學,冰凍切片,細胞涂片,原位雜交等使用的玻片的防脫片處理,以防實驗操作過程中組織掉片。也可用于細胞培養(yǎng),增加細胞貼壁能力?!?/span> 皺褶青霉PCR檢測試劑盒說明書p53誘導(dǎo)蛋白5抗體Demethyl calyciphylline A別名: 分子式: C22H29NO4性狀: Powder純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 虎皮楠屬;虎皮楠生物堿;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 錨蛋白重復(fù)域5抗體Xanthoplanine別名: 分子式: C21H26NO4性狀: Brown powder純度: 92.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 阿樸啡生物堿;中藥對照品;中藥標準品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 腦鈉通道蛋白2抗體Laurifoline別名: 分子式: C20H24NO4性狀: Brown powder純度: 96.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 樟葉木防己;阿樸啡生物堿;中藥對照品;中藥標準品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 腦鈉通道蛋白4抗體Allantoin別名: 分子式: C4H6N4O3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 中藥對照品;中藥標準品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 小腸鈉通道蛋白5抗體4-Hydroxycephalotaxine別名: 分子式: C18H21NO5性狀: Powder純度: 97.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 三尖杉;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 APXL蛋白抗體Daphmacropodine別名: 分子式: C32H51NO4性狀: Powder純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 虎皮楠屬;虎皮楠生物堿;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 敏感離子通道蛋白3抗體Paxiphylline E別名: Daphnilongeranin A N-oxide分子式: C23H29NO5性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 虎皮楠屬;虎皮楠生物堿;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 天門冬氨β羥化酶抗體Codaphniphylline別名: 分子式: C30H47NO3性狀: Powder純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 虎皮楠屬;虎皮楠生物堿;中藥對照品;中藥標準品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈式反應(yīng)實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 |