產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 產(chǎn)品名稱:貝氏隱孢子蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 英文名稱:Cryptosporidium baileyiPCR 編號(hào):HE30866-R 類別:PCR檢測(cè)試劑盒 儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。 ? 儲(chǔ)需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開(kāi)即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 L-叔亮氨酸鹽酸鹽/(S)-2-氨基-3,3-二甲基丁酸鹽酸鹽/L-tert-Leucine hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR 包裝;5g L-高絲氨酸/(S)-2-氨基-4-羥基丁酸/L-類絲氨酸/L-2-氨基-4-羥基丁酸/L-Homoserine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g D-別異亮氨酸/(2R,3S)-2-氨基-3-甲基戊酸/D-別異閃白氨基酸/D-穩(wěn)異閃白氨基酸/D-allo-Isoleucine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;100g 阿斯巴甜/阿司帕坦/糖肽/L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯/蛋白糖/甜樂(lè)/甜味素/N-L-α-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯/Aspartame 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g 芴甲氧羰酰氯/氯甲酸-9-芴基甲酯/9-芴甲氧羰酰氯/氯甲酸-9-芴甲酯/9-氯甲酸芴甲酯/9-芴甲基氯甲酸酯/9-芴甲氧基/9-芴亞甲氧基甲酰氯/FMOC-C1 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g O-苯并三氮唑-N,N,N,N-四甲脲四氟硼酸酯/O-(IH-苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基異脲四氟化硼/苯并三唑四甲基四氟硼酸/2-(1H-苯并三偶氮L-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸酯/TBTU 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;100mg 氨基甲基樹(shù)脂/氨甲基樹(shù)脂/胺甲基樹(shù)脂/Aminomethyl resin 質(zhì)量規(guī)格:GC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g 2-氯三苯甲基氯樹(shù)脂/2-Chlorotrityl chloride resin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 羥甲基樹(shù)脂/Hydroxymethyl resin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;10g 4-甲苯氫胺樹(shù)脂/MBHA resin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 氯甲基樹(shù)脂/Merrifield resin 質(zhì)量規(guī)格:UV>98%,BR 包裝;1g 聚苯乙烯樹(shù)脂/二乙烯基苯與苯乙烯的共聚物/芳族的合成吸附劑/色譜載體/鉻姆沙伯102/苯乙烯-二乙烯苯共聚物/苯乙烯-二乙烯基苯共聚物/StratoSpheres™ PL-PS/DVB樹(shù)脂/聚(苯乙烯-co-二乙烯基苯)/聚苯乙烯交聯(lián)二乙烯苯/聚苯乙烯樹(shù)脂交聯(lián)/Polystyrene resin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g Rink-Amide樹(shù)脂/Rink-Amide resin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g Rink Amide AM樹(shù)脂/Rink Amide AM resin 質(zhì)量規(guī)格:UV>97%,無(wú)物,BR 包裝;1g 三苯甲基氯樹(shù)脂/Trityl chloride resin 質(zhì)量規(guī)格:UV≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 王樹(shù)脂/Wang resin 質(zhì)量規(guī)格:UV≥97%,BR 包裝;10ml 多巴胺鹽酸鹽/3-羥基酪胺鹽酸鹽/鹽酸-3-羥基酪胺/兒茶酚乙胺鹽酸鹽/3,4-二羥基-β-苯基乙胺鹽酸鹽/4-(2-氨基乙基)-1,2-苯二酚鹽酸鹽/Dopamine hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;50ml 貝氏隱孢子蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格Paracoccus│aminovorans 中文名稱:食氨副球菌種屬:Paracoccus│aminovorans分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:在無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基:中以100mg/l的滅多威為碳源培養(yǎng),經(jīng)過(guò)24小時(shí)滅多威降解率50%~55%。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:98% Myroides│odoratimimus 中文名稱:擬香味類香味菌種屬:Myroides│odoratimimus分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:能于30℃、3天降解約500ppm的菲,降解率為50-60%左右,萘為碳源(無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基:)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:98% Enterobacter│Oryzae 中文名稱:稻腸桿菌種屬:Enterobacter│Oryzae分離基物:廣州刺竹根提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:3生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:97% Pandoraea│pnomenusa 中文名稱:肺炎潘多拉菌種屬:Pandoraea│pnomenusa分離基物:活性污泥提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:環(huán)境治理培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:97% Pseudomonas│proteolytica 中文名稱:解朊假單胞菌種屬:Pseudomonas│proteolytica提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:培養(yǎng)基:KNO3 2g;MgSO4.7H2PO 2g;K2HPO4 0.5g;鉀鈉 20g;瓊脂 20g培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:A4生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:97% Serratia│marcescens 中文名稱:褪色沙雷氏菌退色亞種(粘質(zhì)沙雷氏菌, 粘質(zhì)塞氏桿菌, 淡化沙雷氏菌)種屬:Serratia│marcescens提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:培養(yǎng)基:KNO3 2g;MgSO4.7H2PO 2g;K2HPO4 0.5g;鉀鈉 20g;瓊脂 20g培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:A3生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:99.99% metals basis Janthinobacterium│sp. 中文名稱:紫色桿菌種屬:Janthinobacterium│sp.分離基物:云斑天牛Batocera horsfieldi腸道提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)堿性植酶酸培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長(zhǎng)條件:26℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:99.99% metals basis Pseudomonas│flectens 中文名稱:彎曲假單胞菌種屬:Pseudomonas│flectens提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:97% 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 |