產(chǎn)品僅用于科研注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。 產(chǎn)品名稱:大片吸蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格 英文名稱:Fasciola giganticaPCR 編號:HE30980-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 ? 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 丙二酸鈉/丙二酸鹽/丙二酸二鈉鹽/縮蘋果酸鈉/Sodium malonate 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 包裝;5g 丙酸鈉/丙酸鈉鹽/Sodium propionate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;100g 癸二酸/辛二甲酸/皮脂酸/葵二酸/辛-1,8-二甲酸/泌酯酸/Sebacic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(N) 包裝;500g 辛二酸/十八烷二酸/軟木酸/1,6-己烷二羧酸/栓酸/栓皮酸/軟木脂/銓酸/芊二酸/1,8-辛二酸/Suberic acid 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) 包裝;1g 曲酸/曲菌酸/5-羥基-2-羥甲基-4H-吡喃-4-酮/5-羥基-2-羥甲基-4-吡喃酮/鞠酸/5-羥基-2-羥甲基-1,4-吡喃酮/Kojic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;25g 糠酸/呋喃甲酸/2-呋喃羧酸/焦粘液酸/麩酸/2-糠酸/焦粘酸/2-呋喃甲酸/呋喃甲酸/Furoic acid 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) 包裝;5g 沒食子酸一物/3,4,5-三羥基苯甲酸/五倍子酸/棓酸/倍酸/Gallic acid 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 包裝;1g 沒食子酸/3,4,5-三羥基苯甲酸/五倍子酸/棓酸/倍酸/石墨酸/氧化石墨/Gallic acid 質(zhì)量規(guī)格:>65.0%(GC) 包裝;250mg 焦性沒食子酸/焦酚/連苯三酚/鄰苯三酚/1,2,3-苯三酚/1,2,3-三羥基苯/沒食子酚/焦酸/焦棓酚/焦棓酸/焦倍酚/焦倍酸/焦櫚酚/Pyrogallic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(N) 包裝;1g 沒食子酸甲酯/棓酸甲酯/五棓子酸甲酯/3,4,5-三羥基苯甲酸甲酯/甲基三羥基苯甲酯/Methyl gallate 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC) 包裝;1g 沒食子酸正丙酯/沒食子酸丙酯/3,4,5-三羥基苯甲酸丙酯/五子酸丙酯/五棓子酸丙酯/3,4,5-三羥基苯甲酸正丙酯/倍酸丙酯/丙基-3,4,5-三羥基苯甲酸酯/雷尼替丁雜質(zhì)B/棓丙酯/Propyl gallate 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 包裝;1g 乙酸銨/乙酸铔/醋酸銨/乙酸銨鹽/醋酸氨/Ammonium acetate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;5g 二乙三胺五乙酸/二乙三胺五醋酸/二亞乙基三胺五乙酸/二乙烯三胺五乙酸/二乙烯三胺五醋酸/促排靈-235/二乙基三胺五乙酸/五醋三胺/DETAPAC/DTPA 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;250mg 羥基乙酸/甘醇酸/羥基醋酸/乙醇酸/α-羥基乙酸/乙二醇酸/Glycolic acid 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 包裝;5g 羥基乙酸鈉/羥基乙酸單鈉鹽/乙醇酸鈉/甘醇酸鈉/羥基醋酸鈉/Sodium glycollate 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 包裝;25g 5-羥基吲哚乙酸/5-羥吲哚乙酸/5-羥基吲哚-3-乙酸/5-羥基吲哚-3-醋酸/5-HIAA 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 包裝;5g 4-甲氧基/對甲氧基/4-Methoxyphenylacetic acid 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC) 包裝;1g 大片吸蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格 Actinoplanes│humidus 中文名稱:濕游動放線菌種屬:Actinoplanes│humidus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0027生長條件:28C存儲條件:-80℃冰箱凍結;真空冷凍干燥 純度:97% Streptomyces│humidus 中文名稱:濕鏈霉菌種屬:Streptomyces│humidus分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0012生長條件:28C存儲條件:-80℃冰箱凍結;真空冷凍干燥 純度:99% Rhizoscyphus│sp. 中文名稱:柔膜菌屬種屬:Rhizoscyphus│sp.分離基物:Chorisodontium aciphyllum提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應用領域:產(chǎn)生抗菌活性物質(zhì),抗糞腸球菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014生長條件:25C存儲條件:液氮超低溫凍結;-80℃冰箱凍結 純度:99% Streptomyces│cinnamonensis 中文名稱:肉桂(地)鏈霉菌種屬:Streptomyces│cinnamonensis提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應用領域:產(chǎn)生Monensin莫能霉素培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0039生長條件:28C存儲條件:真空冷凍干燥 純度:95% Chaetomium│globosporum 中文名稱:球孢毛殼種屬:Chaetomium│globosporum分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014生長條件:26C存儲條件:-80℃冰箱凍結;真空冷凍干燥 純度:95% Pestalotia│sp. 中文名稱:盤多毛孢屬菌種種屬:Pestalotia│sp.分離基物:人字木植物組織提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應用領域:藥用植物內(nèi)生菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0027生長條件:28C存儲條件:-80℃冰箱凍結 純度:98% Emericella│sp. 中文名稱:泡波曲霉種屬:Emericella│sp.提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應用領域:活性物質(zhì);抗凝血培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0018生長條件:28C存儲條件:-80℃冰箱凍結 純度:98% Nocardia│sp. 中文名稱:諾卡氏菌屬菌種種屬:Nocardia│sp.分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:Tem3抑制劑;抗恥垢分枝桿菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0027生長條件:28C存儲條件:-80℃冰箱凍結;真空冷凍干燥 純度:97% 反應五要素: 參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。 技術原理: DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。 |