實驗外包: 1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析 2.轉(zhuǎn)錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq 3.蛋白質(zhì)組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM 4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR 5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA 6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選 7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR 8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建 服務流程: 接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務。 ? 產(chǎn)品名稱 | 中華枝睪吸蟲PCR檢測試劑盒說明書 | 英文名稱 | Clonorchis sinensisPCR | 貨號 | HE30821-R |
使用方法: 一、樣品 DNA 的制備 用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。 二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。 1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。 2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。 3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。 4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。 5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。 6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。 8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。 PCR實驗方法步驟: 方法 1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。 3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 特點優(yōu)勢: 1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。 2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。 3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。 4. 實用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。 5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。 6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。 1,1'-聯(lián)-2-萘酚 1,1'-Bi-2-naphthol >99.0%(GC) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,* 包裝;1g 1,1'-聯(lián)-2-萘酚 1,1'-Bi-2-naphthol >99.0%(GC) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1g 膽紅素 Bilirubin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,鈉離子-鈣離子交換子(NCX)抑制劑 包裝;1g 膽紅素 Bilirubin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,高效的選擇性亞型2鈉-葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白(SGLT2) 抑制劑 包裝;250mg 聯(lián)芐 Dibenzyl >99.0%(GC) 質(zhì)量規(guī)格:>98% 包裝;5g 聯(lián)芐 Dibenzyl >99.0%(GC) 質(zhì)量規(guī)格:>98% 包裝;1g 甜菜堿鹽酸鹽 Betaine Hydrochloride >98.0%(T) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;25g 甜菜堿鹽酸鹽 Betaine Hydrochloride >98.0%(T) 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 包裝;5g 雙(2-氯乙基)醚 Bis(2-chloroethyl) Ether >99.0%(GC) 質(zhì)量規(guī)格:>98% 包裝;25g 1,2-雙(2-氯乙氧基)乙烷 1,2-Bis(2-chloroethoxy)ethane >98.0%(GC) 質(zhì)量規(guī)格:>99% 包裝;5g 1,2-雙(2-氯乙氧基)乙烷 1,2-Bis(2-chloroethoxy)ethane >98.0%(GC) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,MGMT 的抑制劑 包裝;1g 2,2'-聯(lián)喹啉 2,2'-Biquinoline >98.0%(T) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;5g 2,2'-聯(lián)喹啉 2,2'-Biquinoline >98.0%(T) 質(zhì)量規(guī)格:>98% 包裝;500ml 4,4'-聯(lián)吡啶 4,4'-Bipyridyl >98.0%(GC&T) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;100ml 4,4'-聯(lián)吡啶 4,4'-Bipyridyl >98.0%(GC&T) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;25ml 2,2'-聯(lián)吡啶 2,2'-Bipyridyl >99.0%(T) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品 包裝;10g 2,2'-聯(lián)吡啶 2,2'-Bipyridyl >99.0%(T) 質(zhì)量規(guī)格:>98% 包裝;50g 中華枝睪吸蟲PCR檢測試劑盒說明書Variovorax│paradoxus (Davis) Willems et al 中文名稱:貪噬菌屬種屬:Variovorax│paradoxus (Davis) Willems et al分離基物:華楹根瘤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:30存儲條件:定期移植法 純度:98% Ensifer│terangae (De Lajudie et al.) Young 中文名稱:適宜中華根瘤菌種屬:Ensifer│terangae (De Lajudie et al.) Young提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:30存儲條件:定期移植法 純度:85% Paenibacillus│peoriae (Montefusco et al.) Heyndrickx et al. 中文名稱:皮奧利亞類芽孢桿菌種屬:Paenibacillus│peoriae (Montefusco et al.) Heyndrickx et al.分離基物:多花胡枝子根瘤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:30存儲條件:定期移植法 純度:98% Herbaspirillum│frisingense Kirchhof et al. 中文名稱:內(nèi)生固氮菌種屬:Herbaspirillum│frisingense Kirchhof et al.分離基物:四棱豆根瘤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:30存儲條件:定期移植法 純度:98% Ensifer│mexicanus L loret et al. 中文名稱:墨西哥劍菌種屬:Ensifer│mexicanus L loret et al.分離基物:墨西哥丁香(又名:毒鼠豆樹)根瘤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:30存儲條件:定期移植法 純度:98% Tyromyces│chioneus (Fr.) P. Karst. 中文名稱:薄皮干酪菌種屬:Tyromyces│chioneus (Fr.) P. Karst.分離基物:子實體提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:98% Pholiota│adiposa (Batsch) P. Kumm. 中文名稱:黃傘種屬:Pholiota│adiposa (Batsch) P. Kumm.分離基物:子實體提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:98% Irpex│lacteus (Fr.) Fr. 中文名稱:白囊耙齒菌種屬:Irpex│lacteus (Fr.) Fr.分離基物:子實體提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:98% |