熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

?
熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點：
成本高；
設(shè)計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
?
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
京尼平苷酸Cre Recombinase (D7L7L) XP® Rabbit mAb (HRP Conjuga)2-羥基-5-甲基吡啶

京尼平苷酸(標準品)Phospho-Jak3 (Tyr980/981) (D44E3) Rabbit mAb2-溴-5-氟

原兒茶酸,3,二羥基甲酸Phospho-Jak3 (Tyr980/981) (D44E3) Rabbit mAb硝酸鍶

原兒茶酸(標準品)DNMT1 (D63A6) XP® Rabbit mAb無水氯化鈣

原兒茶,3,二羥基甲DNMT1 (D63A6) XP® Rabbit mAb1,4,7,10-四氮環(huán)十二烷四鹽酸鹽

原兒茶(標準品)ERp72 (D70D12) XP® Rabbit mAb硫酸亞鐵銨

甲砜霉素甘氨酸酯鹽酸鹽ERp72 (D70D12) XP® Rabbit mAb2,6-二甲基大茴香

2.二羥基-6-甲基-煙酸乙酯La Antigen (D19B3) Rabbit mAb過氧化單硫酸鹽

恩拉霉素,持久殺菌素HSP27 (E1J4D) Rabbit mAb (IHC Preferred)溴化基鎂

(+)-兒茶素水合物SimpleChIP® Human γ-Actin Promor Primers硝酸鑭

(+)-兒茶素水合物（標準品）SGLT1 Antibody基氯化鎂

(+)-兒茶素（標準品）mTOR (7C10) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)9-蒽酸

維生素B6,鹽酸吡哆Phospho-S6 Ribosomal Proin (Ser240/244) (D68F8) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)2-溴-氟甲酸

維生素B6（標準品）α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)脫羧氯雷他定

非達霉素SimpleChIP® Human γ-Actin Intron 3 Primers嘧啶-5-甲

比枯枯靈,右旋荷包牡丹mTOR (7C10) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)2-乙基吡啶

比枯枯靈,右旋荷包牡丹（標準品）STING (D1V5L) Rabbit mAb (Rodent Preferred)溴-氟甲酸

石杉甲Sox2 (D6D9) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)四氫吡喃-2-甲
貓皰疹病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒細胞分裂周期蛋白5抗體phospho-c-Abl(Tyr89) /FITC  熒光素標記兔抗、非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體IgG100 ul

β淀粉樣肽/Aβ42抗體Phospho-HDAC3 (Ser424)/FITC  熒光素標記兔抗、大、組蛋白去乙?；?抗體IgG100 ul

ADCK4蛋白抗體CAD/CPAN/FITC  熒光素標記Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶抗體IgG100 ul

抑癌蛋白AIMP3抗體CA I/FITC  熒光素標記碳酸酐酶1抗體IgG100 ul

相關(guān)蛋白AKAP抗體CA II /FITC  熒光素標記碳酸酐酶2抗體IgG100 ul

蛋白激酶A錨定蛋白6抗體Calcineurin Alpha /PP-2B alpha 1 /FITC  熒光素標記蛋白酸酯酶-2B催化亞單位抗體IgG100 ul

肺α/β水解酶蛋白1抗體caldesmon/smooth muscle /FITC  熒光素標記鈣調(diào)結(jié)合蛋白/鈣調(diào)素結(jié)合蛋白抗體IgG100 ul

水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白13抗體p-Caldesmon/FITC  熒光素標記酸化鈣介質(zhì)素抗體IgG100 ul

水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白14B抗體Smoothened/SMOH /FITC  熒光素標記跨膜蛋白Smoothened抗體IgG100 ul
PCR技術(shù)的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。