產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱：溶組織內(nèi)阿米巴PCR檢測(cè)試劑盒說明書
英文名稱：Entamoeba histolyticaPCR
編號(hào)：HE30925-R
類別:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
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儲(chǔ)需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn)：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對(duì)照，便于分析試驗(yàn)結(jié)果。
保存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
鹽酸丫啶/鹽酸吖啶/吖啶鹽酸鹽/鹽酸氮(雜)蒽/Acridine hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格：鑒別 包裝;5g

鹽酸丫黃素/鹽酸吖啶黃/氯化-3,6-二氨基-10-甲基丫啶/三勝黃/丫黃素鹽酸鹽/錐黃/Acriflavine hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 包裝;1g

甲基橙/橙黃Ⅲ/金蓮橙D/對(duì)二甲基氨基偶氮苯磺酸鈉/4-[[4-(二甲氨基)苯基]偶氮基]苯磺酸鈉/酸性橙 52/半日花素B/Methyl orange 質(zhì)量規(guī)格：鑒別 包裝;250mg

甲基紫/甲基青蓮/堿性紫1/甲基紫2B/紫/堿性紫1/甲紫/堿基青蓮/堿性紫2B/Methyl violet 質(zhì)量規(guī)格：鑒別 包裝;5g

甲基紫6B/甲基青蓮6B/煌紫/亮紫/五甲基副品紅堿/Methyl violet 6B 質(zhì)量規(guī)格：鑒別用 包裝;25g

溴甲酚紫/溴甲酚紅/二溴鄰甲酚磺呋酞/二溴鄰甲酚磺酞/二溴鄰甲酚磺酰酞/BCP 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 包裝;5g

溴甲酚紫鈉/溴甲酚紅鈉/5,5ˊ-二溴鄰甲酚磺酞鈉鹽/5,5′-二溴鄰甲酚紅鈉/5,5′-二溴鄰甲酚磺酰酞鈉/BCP，Na 質(zhì)量規(guī)格：內(nèi)標(biāo) 包裝;50g

固紫醬GBC鹽/固深紅GBC/重氮色鹽紫醬/堅(jiān)牢紫醬GBC鹽/熒光重氮色鹽紫醬/棗紅色基GBC/棗紅貝司GBC/紫醬色基GBC /固深紅GBC /堅(jiān)牢醬紫GBC鹽/Fast Garnet GBC salt 質(zhì)量規(guī)格：內(nèi)標(biāo) 包裝;25g

固黑K鹽/固黑K/固黑K半氯化鋅鹽/2,5-二甲氧基-4-[(4-基)偶氮]苯重氮(T-4)-四氯鋅酸鹽/耐曬黑K鹽/4-氨基-2,5-二甲氧基-4-硝基偶氮苯重氮鹽/Fast Black K Salt 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 包裝;5g

固鹽/黑色基B/4,4′二氨基二硫酸鹽/4,4'-二氨基二硫化物/耐曬鹽/4,4'-亞胺雙硫酸鹽/C.I.冰染重氮組分109/Fast Black B Salt 質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR 包裝;1g

固藍(lán)BB鹽/堅(jiān)牢藍(lán)BB鹽/氯化-4-重氮-2,5-二乙氧基-N-苯甲?；然\鹽/Fast blue BB salt 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 包裝;25g

固藍(lán)RR鹽/重氮堅(jiān)牢藍(lán)/堅(jiān)牢藍(lán)RR鹽/重氮固藍(lán)RR/4-苯甲酰氨基-2,5-二甲氧基氯化重氮苯氯化鋅鹽/耐曬蘭RR鹽/Fast blue RR salt 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 包裝;5g

氨基黑10B/萘酚藍(lán)黑/牛黑NBR/酸性黑1/藍(lán)黑/酸性黑10B/酸性藍(lán)黑10B/酸性青光藍(lán)10B/4-氨基-5-羥基-3-(對(duì)偶氮)-6-(苯偶氮)-2,7-萘二磺酸二鈉鹽/萘藍(lán)黑/對(duì)偶氮-3,6-二磺酸-1-氨基-8-萘酚-7-偶氮苯鈉鹽/Amino black 10B 質(zhì)量規(guī)格：供含量測(cè)定用 包裝;1g

蘇丹Ⅳ/蘇旦IV/四號(hào)蘇丹紅/猩紅/鄰甲苯偶氮鄰甲苯偶氮-3-萘酚/油溶暗紅/溶劑紅24/蘇丹紅B/1-[4-(鄰甲苯偶氮)鄰甲苯偶氮]-2-萘酚/1-(2-甲基-4-(2-甲基苯基偶氮)苯基偶氮)-2-萘酚/鄰甲苯偶氮鄰甲苯偶氮-2-萘酚/油溶紅/燭紅/Sudan Ⅳ 質(zhì)量規(guī)格：內(nèi)標(biāo) 包裝;5g

蘇丹Ⅲ/三號(hào)蘇丹紅/黃光油溶紅/油紅/苯基偶氮（4-偶氮-1）-2-萘酚/蘇旦Ⅲ/蘇丹紅Ⅲ/1-[4-(苯基偶氮)苯基偶氮]-2-萘酚/溶劑紅23/Sudan Ⅲ 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 包裝;250g

蘇丹Ⅱ/溶劑橙7/蘇旦Ⅱ/2,4-二甲基苯(1-偶氮-1)-2-羥基萘/2,4-二甲基苯偶氮-2′-萘酚/二號(hào)蘇丹紅/油溶猩紅/黃光油溶橙/1-[(2,4-二甲苯基)偶氮]-2-萘酚/蘇丹紅II/蘇丹橙Ⅱ/1-二甲苯基偶氨-2-萘酚/Sudan Ⅱ 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 包裝;100g

蘇丹I/蘇旦I/苯基(偶氮-1)-2-羥基萘/一號(hào)蘇丹紅/苯基偶氮-2-萘酚/苯偶氮苯酚/溶劑黃14/1-(苯基偶氮)-2-萘酚/油溶黃/苯基(偶氮-1)-2-羥基萘/Sudan I 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 包裝;25g
溶組織內(nèi)阿米巴PCR檢測(cè)試劑盒說明書Pasteurella│pneumotropica 中文名稱：嗜肺巴氏桿菌種屬:Pasteurella│pneumotropica分離基物:兔肝臟病料提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:56生長條件:37存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法; 純度：97%

Streptococcus│bovis 中文名稱：牛鏈球菌種屬:Streptococcus│bovis分離基物:牛脾臟病料提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:396生長條件:37存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法;礦物油法; 純度：97%

Alphaherpesvirinae│Infectious bovine rhinotracheitis virus 中文名稱：傳染性牛鼻氣管炎病毒種屬:Alphaherpesvirinae│Infectious bovine rhinotracheitis virus分離基物:鼻腔棉拭子安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究和分類培養(yǎng)方法生長條件:37存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法; 純度：98%

Mannheimia│haemolytica 中文名稱：溶血性曼氏桿菌種屬:Mannheimia│haemolytica分離基物:病豬肺臟提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:用于科研培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:0生長條件:37存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法; 純度：98%

Avipoxvirus│Fowlpox virus 中文名稱：雞痘病毒種屬:Avipoxvirus│Fowlpox virus分離基物:病雞結(jié)痂提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:0生長條件:37存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法; 純度：98%

Influenzavirus A│Avian influenza virus 中文名稱：禽流感病毒種屬:Influenzavirus A│Avian influenza virus分離基物:病雞提供形式:凍結(jié)物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:實(shí)驗(yàn)研究其生物學(xué)活性，并進(jìn)一步從基因平上進(jìn)行分析。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:0生長條件:37 純度：98%

Streptococcus│suis 中文名稱：豬鏈球菌種屬:Streptococcus│suis分離基物:病豬提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:抗藥性檢驗(yàn)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:396生長條件:37存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法; 純度：98%

Riemerella│anatipestifer 中文名稱：鴨疫里氏桿菌種屬:Riemerella│anatipestifer分離基物:鴨心血安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:科研教學(xué)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:0生長條件:37存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法; 純度：98%
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
技術(shù)原理：
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。