特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途! 產(chǎn)品名稱 | 斯氏分枝桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒 | 英文名稱 | Mycobacterium szulgai | 貨號 | YSP96960 |
熒光染料的優(yōu)點: 產(chǎn)品僅用于科研使用簡便; 可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合; 價格便宜; 熒光染料的缺點: 不能區(qū)分不同的雙鏈DNA 引物二聚體會影響檢測的敏感性 非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性 引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識別,進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決??偟膩碚f,SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。 ? 熒光探針: Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán),3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。 正常情況下兩個基團(tuán)的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時,引物與該探針同時結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。 當(dāng)擴增延伸到探針結(jié)合的位置時,Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。 TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題,反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實驗時間。 TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點: 熒光背景低; 敏感性高; 雜交穩(wěn)定性高; 熒光光譜分辨率好; 特異性高。 TaqMan探針技術(shù)的缺點: 成本高; 設(shè)計難度大; 只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。 由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。 PCR技術(shù)的定量原理: 擴增曲線 在Real- qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴增過程進(jìn)行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。 在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。 PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。 ? 熒光定量PCR原理: 產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。 一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。 色素上皮源性因子抗體 Anti-PEDF 0.1ml Anti-SSTR2 /FITC 熒光素標(biāo)記生長抑素受體2(SSTR2)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml Rhesus antibody Rh Phospho-Myt1(Ser83) 酸化髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1抗體 規(guī)格 0.1ml MMP-1(matrix metalloproteinases-1) 基質(zhì)金屬蛋白酶-1(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg 人載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒英文名稱:Human apoprotein B100,apo-B100 ELISA Kit* 人載脂蛋白C3(Apo C3)ELISA試劑盒英文名稱:Human Apolipoprotein C3,Apo C3 ELISA Kit* 人載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒英文名稱:Human Apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit進(jìn)口/原裝 C11orf21 英文名稱: 11號染色體開放閱讀框21抗體 0.2ml Anti-IL-1R II 白介素1受體Ⅱ抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml OH-PYD(Human Hydroxy-Pyridinium crosslinks) ELISA Kit 人羥基膠原吡啶交聯(lián)Multi-class antibodies規(guī)格: 48T Anti-MCP-2/CCL8 單核細(xì)胞趨化蛋白2抗體(人)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml Rhesus antibody Rh kappa Opioid receptor kappa型受體抗體 規(guī)格 0.1ml Human Lebtospira IgM ELISA Kit 人鉤端螺旋體IgM 96T PKC theta 英文名稱: 蛋白激酶C theta抗體 0.1ml 溶酶體H轉(zhuǎn)運ATP酶V0亞基a2 多克隆抗體VPP2 Polyclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 前-B-淋巴細(xì)胞基因1 多克隆抗體VPREB Polyclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 液泡蛋白分選蛋白11 多克隆抗體VPS11 Polyclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 液泡蛋白分選蛋白4B 多克隆抗體VPS4B Polyclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 牛痘相關(guān)激酶1 多克隆抗體VRK1 Polyclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 糖蛋白A34 多克隆抗體VSIG1 Polyclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 斯氏分枝桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒復(fù)合前列腺特異性抗原單克隆抗體RRAD/FITC 熒光素標(biāo)記RRAD抗體IgG100 ul 組織蛋白酶z抗體Runx3/FITC 熒光素標(biāo)記新型抑癌基因/一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因抗體IgG100 ul 2號染色體開放閱讀框84抗體RUNX1/AML1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗、大、急性髓細(xì)胞白血病1蛋白抗體IgG20 ul 酸化鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗體RUNX1/AML1(phospho Ser249) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗、大、急性髓細(xì)胞白血病1蛋白抗體IgG100 ul 組織蛋白酶A抗體RUNX1/AML1(phospho SerS303) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗、大、急性髓細(xì)胞白血病1蛋白抗體IgG20 ul CD34抗體RXR Alpha/FITC 熒光素標(biāo)記核受體RXRα抗體IgG100 ul 周期素D3抗體RPS6/FITC 熒光素標(biāo)記S6核糖體蛋白抗體IgG100 ul 緊密連接蛋白1抗體(C端)S-100A1/FITC 熒光素標(biāo)記鈣結(jié)合蛋白S100A1抗體IgG100 ul 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP α 抗體S100-A8/MRP8/CFAG/FITC 熒光素標(biāo)記鈣結(jié)合蛋白S100A8抗體IgG100 ul |