產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 產(chǎn)品名稱(chēng):巴斯德氏桿菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格 英文名稱(chēng):Pasteurella spp.PCR 編號(hào):HE31356-R 類(lèi)別:PCR檢測(cè)試劑盒 儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。 ? 儲(chǔ)需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開(kāi)即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 增強(qiáng)型DAB顯色試劑盒(20×) 3ml 別名 增強(qiáng)型DAB顯色試劑盒(20×)英文名稱(chēng) Metal Enhanced DAB Substrate Kit,20×儲(chǔ)存條件 -20℃,避光,有效期1年單位 瓶 產(chǎn)品簡(jiǎn)介: 增強(qiáng)型 DAB 顯色試劑盒是一種借助辣根過(guò)氧化物酶(HRP) ,用于免疫組化顯色、原位雜交顯色或 Western、 Southern 、Northern、EMSA 等膜顯色的試劑盒。 DAB(二氨基聯(lián))是辣根過(guò)氧化物酶的常用底物。在 辣根過(guò)氧化物酶的催化下,DAB 會(huì)產(chǎn)生棕色沉淀。該棕色沉淀不溶于水和乙醇。 本產(chǎn)品采用特殊配方,靈敏度高,背景低,重復(fù)性好,儲(chǔ)存穩(wěn)定,使用方便,適合于蛋白印跡、免疫組織 化學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)、斑點(diǎn)印跡和生物芯片等的染色和顯色反應(yīng)。 操作說(shuō)明: 1. 對(duì)于組織切片或蛋白質(zhì)印記膜,在與辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的抗體或其它形式的探針?lè)跤螅眠m 當(dāng)洗滌液洗滌 3-5 次,每次 3-5 分鐘?!?. 向 5 ml 蒸餾水中加入 250 μl 溶液 A、250 μl 溶液 B、250 μl 溶液 C,并混合均勻,即為 DAB 工作液,1h 內(nèi)使用。注意:溶液 A/B/C 必須*融化后使用。 3. 向組織切片或膜上加入適量 DAB 工作液,確保能充分覆蓋樣品?!?. 室溫避光孵育 1-30 分鐘,顯色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可引起本底增高,故應(yīng)密切觀察顯色過(guò)程(一般 3-10 分鐘理想), 并在本底較淺且達(dá)到適當(dāng)顯色強(qiáng)度時(shí)以流水漂洗終止顯色反應(yīng)?!?. 對(duì)于組織切片或細(xì)胞樣品,顯色反應(yīng)終止后可對(duì)其進(jìn)行其他染料復(fù)染。對(duì)于膜,顯色反應(yīng)終止后,可以室 溫晾干避光保存?!?/span> 3MM濾紙 Whatman 27cm×100m 單位 張whatman原裝3mm層析濾紙。實(shí)驗(yàn)室相關(guān)耗材?!?MM濾紙 Whatman-3MM層析濾紙 3030-704 規(guī)格27cm×1m 27cm×100m PVDF膜(0.22um)Millipore 26.5*3.75 單位 卷英文名稱(chēng) Immobilon-PSQ PVDF,0.2 µm科研實(shí)驗(yàn)用耗材。 PVDF膜(0.45um)13.25*15cm 13.25*15 單位 張英文名稱(chēng) Immobilon-P PVDF,0.45 µm科研實(shí)驗(yàn)用耗材。 麗春紅S 10g 有效期 2年級(jí)別 BS Grade別名 猩紅S;Fast ponceau 2B;Ponceau Sextra英文名稱(chēng) Ponceau SCAS 6226-79-5分子式 C22H12N4Na4O13S4分子量 760.61儲(chǔ)存條件 RT外觀(性狀) 深紅色粉末單位 瓶說(shuō)明:麗春紅(Ponceau S)也稱(chēng)猩紅,可以用于PVDF膜、硝酸纖維素膜(nitrocellulose membrane)和醋酸纖維素膜(cellulose acetate membrane)上的蛋白的檢測(cè)。麗春紅帶負(fù)電荷,可以與帶正電荷的氨基酸殘基結(jié)合,同時(shí)麗春紅也可以與蛋白的非極性區(qū)相結(jié)合,從而形成紅色的條帶。麗春紅染色的靈敏度不及考馬斯亮藍(lán)染色。麗春紅對(duì)蛋白的染色是可逆的,染色后可以用蒸餾水,PBS或其它適當(dāng)溶液洗去。因此,蛋白質(zhì)N端測(cè)序時(shí)將SDS-PAGE膠上的蛋白轉(zhuǎn)移到PVDF膜,用麗春紅染色后將目的條帶切下用于測(cè)序?!?/span> 巴斯德氏桿菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格 激活素受體樣激酶1抗體3'-Demethoxypiplartine別名: 分子式: C16H17NO4性狀: Powder純度: 95.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù) 激活素A受體1B抗體Cyclo(D-Val-L-Pro)別名: 分子式: C10H16N2O2性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù) 磷化雄激素受體抗體Cyclo(L-Ala-L-Pro)別名: Cyclo(alanylprolyl)分子式: C8H12N2O2性狀: Oil純度: 96.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 對(duì)照品;標(biāo)準(zhǔn)品;微生物代謝產(chǎn)物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù) 磷化A-Raf抗體Cyclo(D-Phe-L-Pro)別名: 分子式: C14H16N2O2性狀: Oil純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 對(duì)照品;標(biāo)準(zhǔn)品;微生物代謝產(chǎn)物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù) ?;拾泵擋C?抗體5,6-Dihydropyridin-2(1H)-one別名: 分子式: C5H7NO性狀: Oil純度: 96.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù) 脂肪細(xì)胞特異性粘附分子抗體3-(4-Methoxyphenyl)-1-(pyrrol-1-yl)propan-1-one別名: 分子式: C14H15NO2性狀: Cryst.純度: 96.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù) 腺相關(guān)病毒5抗體Cyclo(L-Leu-trans-4-hydroxy-L-Pro)別名: 分子式: C11H18N2O3性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù) 腺苷活化蛋白激酶γ3抗體3-Phenyl-1-(pyrrol-1-yl)propan-1-one別名: 分子式: C13H13NO性狀: Cryst.純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù) 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 |