特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途! 產(chǎn)品名稱 | 匙狀*毛樣線蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒 | 英文名稱 | Nematodirus spathiger | 貨號 | YSP97001 |
熒光染料的優(yōu)點: 產(chǎn)品僅用于科研使用簡便; 可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合; 價格便宜; 熒光染料的缺點: 不能區(qū)分不同的雙鏈DNA 引物二聚體會影響檢測的敏感性 非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性 引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識別,進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說,SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。 ? 熒光探針: Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán),3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。 正常情況下兩個基團(tuán)的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時,引物與該探針同時結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。 當(dāng)擴增延伸到探針結(jié)合的位置時,Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。 TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題,反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實驗時間。 TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點: 熒光背景低; 敏感性高; 雜交穩(wěn)定性高; 熒光光譜分辨率好; 特異性高。 TaqMan探針技術(shù)的缺點: 成本高; 設(shè)計難度大; 只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。 由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。 PCR技術(shù)的定量原理: 擴增曲線 在Real- qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴增過程進(jìn)行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。 在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。 PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。 ? 熒光定量PCR原理: 產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。 一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。 CXorf6 英文名稱: X染色體開放閱讀框6抗體 0.1ml Anti-Batroxobin 蛇毒巴曲酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml Egr1 英文名稱: 早期生長應(yīng)答蛋白1抗體 0.1ml P-糖蛋白 Anti-P-GP 0.1mlinterferon gamma inducing factor,MIGF ELISA 720mgHPLC≥98% 柚皮苷;柑橘甙,異橙皮甙Naringin10236-47-220mgHPLC≥98% 柚皮素;4'',5,7-三羥基黃酮;;柚皮苷元;柑橘素Naringenin480-41-120mgHPLC≥98% 羽扇豆醇Lupeol545-47-120mgHPLC≥98% 大鼠脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒 進(jìn)口/原裝 英文名稱: Rat adiponectin,ADP ELISA Kit 大鼠脂酰輔酶A合成酶(ACS)ELISA試劑盒 進(jìn)口/原裝 英文名稱: Rat Fatty acyl-CoA synthetase,ACS ELISA Kit 大鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒 進(jìn)口/原裝 英文名稱: Rat neutrophil elastase,NE ELISA Kit 大鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒 進(jìn)口/原裝 英文名稱: Rat neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL ELISA Kit 大鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA試劑盒 進(jìn)口/原裝 英文名稱: Rat neutrophil activating protein-2,NAP-2 ELISA Kit 大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒 進(jìn)口/原裝 英文名稱: Rat Tumor necrosis factor α,TNF-α? Anti-phospho-STAT1 (Ser727) /FITC 熒光素標(biāo)記酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml Rhesus antibody Rh phospho-Myosin light chain(Ser20) 酸化肌球蛋白輕鏈抗體 規(guī)格 0.1ml MMP-14(Matrix metalloproteinase-14) 金屬基質(zhì)蛋白酶-14Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg C17orf74 英文名稱: 17號染色體開放閱讀框74抗體 0.2ml Anti-OPGL/ODF 骨保護(hù)蛋白配體抗體(破骨細(xì)胞分化因子)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml AFU(Human alpha-L-fucosidase) ELISA Kit 人αL巖藻糖苷酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T Anti-Phospho-Numb (Ser276) 酸化膜相關(guān)蛋白Numb抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml Rhesus antibody Rh IFN gamma 干擾素-γ抗體 規(guī)格 0.1ml MOG ELISA Kit (human) 抗髓鞘少樹突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白(人) 96T Prostatic Acid Phosphatase 英文名稱: 前列腺酸性酸酶抗體 0.2ml 核酮糖-1,5-二酸羧化酶/加氧酶 (Large Chain) 單克隆抗體Rubisco (Large Chain) Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul TATA結(jié)合蛋白 單克隆抗體TBP/TATA Binding Protein Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 親環(huán)素B 單克隆抗體Cyclophilin B Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul Desmin 單克隆抗體Desmin Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 親環(huán)素B 單克隆抗體Cyclophilin B Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul TATA結(jié)合蛋白 單克隆抗體TBP/TATA Binding Protein Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 匙狀*毛樣線蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白37抗體Tumstatin/Col4a3/FITC 熒光素標(biāo)記腫瘤抑素抗體IgG1 Kit 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白47抗體TWIST proin/FITC 熒光素標(biāo)記TWIST轉(zhuǎn)錄因子蛋白抗體IgG100 ul 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體Rabbit human Fibrinogen/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記可溶性纖維蛋白原抗體IgG20 ul 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白58抗體Rabbit human Fibrinogen/FITC 熒光素標(biāo)記纖維蛋白原IgG100 ul 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白94抗體Goat human Fibrinogen/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記羊抗纖維蛋白原100 ul 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白82抗體TY3H/FITC (Tyrosine Hydroxylase ) 熒光素標(biāo)記酪氨酸羥化酶抗體IgG1 ml CDK5激活結(jié)合蛋白2抗體TNK1/FITC 熒光素標(biāo)記非受體型酪氨酸蛋白激酶Tnk1抗體IgG100 ul CDK2相互作用蛋白抗體Phospho-TNK1 (Tyr277)/FITC 熒光素標(biāo)記酸化非受體型酪氨酸蛋白激酶Tnk1抗體IgG1Kit 周期蛋白依賴性激酶14抗體Phospho-Tyk2 (Tyr1054/1055)/FITC 熒光素標(biāo)記酸化非受體酪氨酸蛋白激酶2抗體IgG100 ul 豬脯氨酸羥化酶(PHD)ELISA試劑盒5-HTT 5-羥色胺轉(zhuǎn)運蛋白抗體100 ug鮑肌肉癥病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒 |