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禽嗜血桿菌探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒

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更新日期:
2024-08-28
點(diǎn)擊次數(shù):
1010
產(chǎn)品特點(diǎn):
禽嗜血桿菌探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
  50次禽嗜血桿菌探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒的詳細(xì)資料:

PCR技術(shù)的定量原理:
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中,對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過(guò)程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào),隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無(wú)線性關(guān)系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點(diǎn):
產(chǎn)品僅用于科研使用簡(jiǎn)便;
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合;
價(jià)格便宜;
熒光染料的缺點(diǎn):
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測(cè)的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問(wèn)題可以通過(guò)熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別,進(jìn)而通過(guò)PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決??偟膩?lái)說(shuō),SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。

產(chǎn)品名稱

禽嗜血桿菌探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒

英文名稱

 Haemophilus gallinarum

貨號(hào)

 YSP96773

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熒光探針:
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán),3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí),引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí),Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來(lái),從而使其發(fā)出熒光。檢測(cè)到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問(wèn)題,反應(yīng)結(jié)束后無(wú)需通過(guò)熔解曲線檢測(cè),縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn):
熒光背景低;
敏感性高;
雜交穩(wěn)定性高;
熒光光譜分辨率好;
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn):
成本高;
設(shè)計(jì)難度大;
只能用于檢測(cè)產(chǎn)物長(zhǎng)度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理:
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來(lái)也叫Real-Time PCR,是美國(guó)PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來(lái)的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì),熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán),收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào),這樣我們就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段:熒光背景信號(hào)階段,熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒(méi)有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段, PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
酸依沙吖啶(標(biāo)準(zhǔn)品)D-叔亮氨酸鹽酸鹽

生物素(標(biāo)準(zhǔn)品)十八烷酰

特非那定(標(biāo)準(zhǔn)品)順式十八碳-9-酸

特非那定Fmoc-(2-萘基)-L-氨酸

維生素C鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)5-溴-吡啶甲

硝酸硫(標(biāo)準(zhǔn)品)環(huán)己基酚

α-細(xì)辛腦,細(xì)辛(標(biāo)準(zhǔn)品)3,二甲氧基酮

鹽酸二氧(標(biāo)準(zhǔn)品)3,5-二甲氧基甲酸

靈芝A(標(biāo)準(zhǔn)品)酮酸鈉

阿司咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品)L-氟氨酸

酸倍他索(標(biāo)準(zhǔn)品)(R)-對(duì)甲磺酸縮水甘油酯

丁酸(標(biāo)準(zhǔn)品)N-CBZ-L-氨酸

伊屈潑帕;艾曲波帕二甲氨基硫代酰鹽酸鹽

辣椒平芐氧羰基-L-氨酸

鹽酸阿米洛利N-芐氧羰基-L-絲氨酸

鹽酸阿米洛利(標(biāo)準(zhǔn)品)N-芐氧羰基-L-脯氨酸

3,5-二氨基-6-吡-2-羧酸甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品)異

噻啶(標(biāo)準(zhǔn)品)2,2,2-三
禽嗜血桿菌探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒載脂蛋白D抗體DC-SIGN/CD209/CLEC4L/FITC  熒光素標(biāo)記CD209抗體IgG100 ul

丁?;o酶A合成酶3抗體DC-SIGNR/CD299/FITC  熒光素標(biāo)記CD299抗體IgG20 ul

脂肪細(xì)胞源性亮氨酸氨基肽酶抗體(血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白)DCIR/CLEC4A/FITC  熒光素標(biāo)記C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員A抗體IgG100 ul

線粒體凋亡誘導(dǎo)因子2抗體DCN/FITC  熒光素標(biāo)記抗核心蛋白聚糖抗體IgG100 ul

ABL2蛋白抗體DCP/FITC  熒光素標(biāo)記異常凝血酶原/脫-γ-羧基凝血酶原抗體IgG20 ul

血管緊張素轉(zhuǎn)換酶ACE1抗體DCP /HRP  辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記異常凝血酶原/脫-γ-羧基凝血酶原抗體IgG100 ul

血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2抗體DCX/FITC  熒光素標(biāo)記雙皮質(zhì)素抗體IgG100 ul

Acinus抗體Phospho-Doublecortin (Ser297) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗、大、等酸化雙皮質(zhì)素抗體IgG200 ul

醋酸激酶1抗體D-DIMER/FITC  熒光素標(biāo)記交聯(lián)纖維蛋白二聚體抗體IgG1 ml

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 禽嗜血桿菌 探針?lè)?/a> 熒光PCR檢測(cè)試劑盒
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