PCR技術(shù)的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題，反應結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點：
成本高；
設計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應的進行，PCR反應產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
酸依沙吖啶（標準品）D-叔亮氨酸鹽酸鹽

生物素（標準品）十八烷酰

特非那定（標準品）順式十八碳-9-酸

特非那定Fmoc-(2-萘基)-L-氨酸

維生素C鈉（標準品）5-溴-吡啶甲

硝酸硫（標準品）環(huán)己基酚

α-細辛腦,細辛(標準品)3,二甲氧基酮

鹽酸二氧（標準品）3,5-二甲氧基甲酸

靈芝A(標準品)酮酸鈉

阿司咪唑(標準品)L-氟氨酸

酸倍他索（標準品）(R)-對甲磺酸縮水甘油酯

丁酸（標準品）N-CBZ-L-氨酸

伊屈潑帕;艾曲波帕二甲氨基硫代酰鹽酸鹽

辣椒平芐氧羰基-L-氨酸

鹽酸阿米洛利N-芐氧羰基-L-絲氨酸

鹽酸阿米洛利(標準品)N-芐氧羰基-L-脯氨酸

3，5-二氨基-6-吡-2-羧酸甲酯（標準品）異

噻啶（標準品）2,2,2-三
禽嗜血桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒載脂蛋白D抗體DC-SIGN/CD209/CLEC4L/FITC  熒光素標記CD209抗體IgG100 ul

丁?；o酶A合成酶3抗體DC-SIGNR/CD299/FITC  熒光素標記CD299抗體IgG20 ul

脂肪細胞源性亮氨酸氨基肽酶抗體（血管內(nèi)皮細胞生長因子誘導蛋白）DCIR/CLEC4A/FITC  熒光素標記C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員A抗體IgG100 ul

線粒體凋亡誘導因子2抗體DCN/FITC  熒光素標記抗核心蛋白聚糖抗體IgG100 ul

ABL2蛋白抗體DCP/FITC  熒光素標記異常凝血酶原/脫-γ-羧基凝血酶原抗體IgG20 ul

血管緊張素轉(zhuǎn)換酶ACE1抗體DCP /HRP  辣根過氧化物酶標記異常凝血酶原/脫-γ-羧基凝血酶原抗體IgG100 ul

血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2抗體DCX/FITC  熒光素標記雙皮質(zhì)素抗體IgG100 ul

Acinus抗體Phospho-Doublecortin (Ser297) /FITC  熒光素標記兔抗、大、等酸化雙皮質(zhì)素抗體IgG200 ul

醋酸激酶1抗體D-DIMER/FITC  熒光素標記交聯(lián)纖維蛋白二聚體抗體IgG1 ml